[发明专利]复合物

权利要求书

1.共价连接的复合物，其包含血管性血友病因子称为VWF及因子VIII的变体称为因子VIII，所述复合物包含半衰期延长部分，前提是其不是一个Fc单体连接至VWF且另一个Fc单体连接至因子VIII的异源二聚体Fc融合物，所述因子VIII的变体保留野生型FVIII的生物学活性的至少10％，其中共价连接不是由半衰期延长部分提供并且其中因子VIII经修饰使得其与VWF形成二硫桥并且因子VIII经修饰而包含VWF的一个或多个结构域。

2.权利要求1的共价复合物，其中通过用半胱氨酸残基置换天然存在的氨基酸或插入半胱氨酸残基而修饰因子VIII，所述半胱氨酸残基与VWF中的半胱氨酸残基形成二硫桥。

3.权利要求2的复合物，其中因子VIII中被置换的天然存在的氨基酸选自因子VIII a3结构域中的氨基酸。

4.权利要求2的复合物，其中因子VIII中被置换的天然存在的氨基酸位于因子VIII a3结构域的氨基酸1653-1660中或氨基酸1667-1674中或氨基酸1675-1688中，或者将半胱氨酸引入FVIII a3结构域的氨基酸1653-1660或氨基酸1667-1674或氨基酸1675-1688的序列中。

5.权利要求2的复合物，其中因子VIII中被置换的天然存在的氨基酸位于C末端结构域中。

6.权利要求1-5中任一项的复合物，其中通过用半胱氨酸残基置换天然存在的氨基酸或插入半胱氨酸残基而修饰VWF，所述半胱氨酸残基与引入因子VIII中的半胱氨酸残基形成二硫桥。

7.权利要求6的复合物，其中VWF中的天然存在的氨基酸为D’或D3结构域中的氨基酸，或其中半胱氨酸残基的插入在D’或D3结构域中。

8.权利要求6的复合物，其中将半胱氨酸残基插入VWF的TIL′结构域、E′结构域、D3结构域、C8-3结构域、TIL-3结构域或E-3结构域，或者VWF中用半胱氨酸残基置换的天然存在的氨基酸为TIL′结构域、E′结构域、D3结构域、C8-3结构域、TIL-3结构域或E-3结构域中的残基。

9.权利要求1的复合物，其中VWF包含FVIII结合结构域或由FVIII结合结构域组成。

10.权利要求1的复合物，其中因子VIII经修饰而包含VWF的C末端结构域CK。

11.权利要求10的复合物，其中因子VIII经修饰而还包含VWF结构域C6、或C5和C6、C3至C6、或结构域C1至C6中的任意一个或多个、或其变体。

12.权利要求1的复合物，其中因子VIII包含SEQ ID NO:2中残基2724-2812或其变体，前提是保留半胱氨酸残基2773。

13.权利要求10-12中任一项的复合物，其中C末端VWF结构域通过可切割连接子连接至因子VIII。

14.权利要求13的复合物，其中可切割连接子包含因子VIII的凝血酶切割位点之一。

15.权利要求13的复合物，其中连接子序列包含其他的氨基酸残基，以提供长度足以允许因子VIII和VWF分别经由a3和D′D3结构域而发生分子内相互作用的肽。

16.权利要求1的复合物，其中在因子VIII的C末端或N末端，或者在因子VIII的B-结构域内，或者部分或全部地取代因子VIII的B-结构域，而对因子VIII进行修饰。

17.权利要求1的复合物，其中因子VIII经修饰而包含VWF的D′D3结构域或其片段。