[发明专利]嗜热性核酸酶用于降解核酸的用途

权利要求书

1.一种经遗传修饰的细胞，其包含编码嗜热性核酸酶基因的异源核酸序列，其中由所述嗜热性核酸酶基因生成的所述嗜热性核酸酶在所述细胞具有正常生长的温度时是潜在的，其中所述经遗传修饰的细胞生成一种或多种终产物，且其中所述一种或多种终产物不是所述嗜热性核酸酶。

2.权利要求1的细胞，其中所述核酸酶是DNA降解性核酸酶。

3.权利要求1的细胞，其中所述核酸酶是RNA降解性核酸酶。

4.权利要求2的细胞，其中所述DNA降解性核酸酶是TaqI核酸酶。

5.权利要求2的细胞，其中所述DNA降解性核酸酶是PhoI核酸酶。

6.权利要求1-5中任一项的细胞，其中所述经遗传修饰的细胞来自植物。

7.权利要求1-5中任一项的细胞，其中所述经遗传修饰的细胞来自动物。

8.权利要求1-5中任一项的细胞，其中所述经遗传修饰的细胞来自微生物。

9.权利要求8的细胞，其中所述微生物选自下组：酵母、真菌、藻类、细菌和古细菌。

10.权利要求9的细胞，其中所述微生物选自下组：耶氏酵母属(Yarrowia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、埃希氏菌属(Escherichia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、副球菌属(Paracoccus)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、念珠菌属(Candida)、汉逊酵母属(Hansenula)、酵母属(Saccharomyces)、被孢霉属(Mortierella)、裂殖酵母属(Schizosaccharomyces)、曲霉属(Aspergillus)、镰孢菌属(Fusarium)、木霉属(Trichoderma)、隐甲藻属(Crypthecodinium)、裂殖壶菌属(Schizochytrium)和破囊壶菌属(Thraustochytrium)。

11.权利要求10的细胞，其中所述耶氏酵母物种是解脂耶氏酵母(Yarrowialipolytica)。

12.权利要求11的细胞，其中所述终产物选自下组：八氢番茄红素、番茄红素、β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、β-隐黄质、叶黄素、玉米黄质、虾青素、角黄素、海胆酮、3-羟基海胆酮、3’-羟基海胆酮、金盏花红素(adonirubin)、紫黄质、侧金盏花黄质(adonixanthin)、泛醌、维生素K、维生素E、视黄醇、视黄醛、视黄酸、棕榈酸视黄酯、和其经修饰的形式。

13.权利要求1的细胞，其中所述嗜热性核酸酶的基因经密码子优化以匹配所述宿主细胞的密码子选择偏好。

14.权利要求4的细胞，其中所述TaqI核酸酶包含具有SEQIDNO:3的氨基酸序列的多肽。

15.权利要求5的细胞，其中所述PhoI核酸酶包含具有SEQIDNO:10的氨基酸序列的多肽。

16.权利要求1的细胞，其中与自不含所述异源核酸序列的细胞的所述终产物的生成相比，所述终产物的生成具有很少的变化或无变化。

17.权利要求1的细胞，其中所述细胞包含多于一种嗜热性核酸酶基因的组合。

18.一种用于在体内和/或在原位降解宿主细胞的核酸的方法，其中所述宿主细胞包含编码嗜热性核酸酶基因的异源核酸序列，其中所述方法包括：

a)在所述嗜热性核酸酶为潜在性的温度培养所述宿主细胞；并

b)通过将步骤(a)中的温度改变至嗜热性核酸酶有活性的温度来降解所述宿主细胞的核酸。

19.权利要求18的方法，其中所述核酸酶是DNA降解性核酸，并且所述核酸是DNA。

20.权利要求19的方法，其中所述宿主细胞的DNA含有重组DNA。

21.权利要求18的方法，其中所述核酸酶是RNA降解性核酸酶，并且所述核酸是RNA。

22.权利要求18-21中任一项的方法，其中步骤(a)中的温度对于所述宿主细胞的生长是最佳的。