[发明专利]用于工业生物催化的工程化转氨酶多肽

权利要求书

1.一种工程化多肽，所述工程化多肽具有转氨酶活性，其中所述工程化多肽包含氨基酸序列，其中所述氨基酸序列与参考序列SEQ ID NO:2之间的氨基酸残基差异为E42G、S54P、C152S、Q155T和C215G/L，或者所述氨基酸序列与参考序列SEQ ID NO:2之间的氨基酸残基差异为E42G、S54P、C152S、Q155T和C215G/L和选自以下的1个、2个、3个、4个、5个、6个或7个氨基酸残基差异：I41C/K、S49T、I108V、E117G、S150F、W156Q、F160P和I267V。

2.根据权利要求1所述的工程化多肽，所述工程化多肽包含以下的残基差异的组合：X42G、X54P、X150F、X152S、X155T、X215G和X267V。

3.一种工程化多肽，所述工程化多肽具有转氨酶活性，其中所述工程化多肽包含氨基酸序列，其中所述氨基酸序列与参考序列SEQ ID NO:2之间的氨基酸残基差异为：

(a)与SEQ ID NO:2相比为E42G、S54P、C152S、Q155T和C215G/L的残基差异和与SEQ IDNO:2相比选自以下的氨基酸残基差异：I41C和I41K；或

(b)选自以下的残基差异的组合：I41C、E42G、S54P、I108V、S150F、C152S、Q155T、W156Q和C215G；I41C、E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、W156Q、F160P和C215L；I41C、E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、W156Q和C215L；I41K、E42G、S54P、I108V、S150F、C152S、Q155T和C215G；I41K、E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T和C215G；I41K、E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、C215G和I267V；E42G、S49T、S54P、I108V、E117G、S150F、C152S、Q155T、W156Q、F160P、C215G和I267V；E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、C215G和I267V；E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、W156Q、F160P、C215L和I267V；E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、W156Q、C215G和I267V；E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、F160P和C215G；E42G、S54P、S150F、C152S、Q155T、F160P和C215L；E42G、S54P、C152S、Q155T和C215G；以及E42G、S54P、C152S、Q155T和C215L。

4.根据权利要求1所述的工程化多肽，其中所述工程化多肽能在合适的反应条件下将底物化合物(2)

转化成产物化合物(1)

5.根据权利要求4所述的工程化多肽，所述工程化多肽能在合适的反应条件下以至少1.2倍于SEQ ID NO:2的活性将化合物(2)转化成化合物(1)。

6.根据权利要求5所述的工程化多肽，其中所述合适的反应条件包括至少50g/L的化合物(2)载量、1mM磷酸吡哆醛、50％二甲基亚砜v/v、1.5M异丙胺、pH 11和55℃。

7.根据权利要求1所述的工程化多肽，其中所述氨基酸序列包含选自以下的序列：SEQID NO:104、106、118、122、124、134、148、156、158、166、168、190、216和220。

8.根据权利要求1所述的工程化多肽，其中所述工程化多肽被固定至固体支持物上。

9.根据权利要求8所述的工程化多肽，其中所述固体支持物是珠或树脂，所述珠或树脂包含具有环氧官能团的聚甲基丙烯酸酯、具有氨基环氧官能团的聚甲基丙烯酸酯、具有十八烷基官能团的苯乙烯/DVB共聚物或具有十八烷基官能团的聚甲基丙烯酸酯。