[发明专利]用于早期检测潜在炎症特别是与移植物的排斥、神经变性病症或抑郁症有关的潜在炎症的体外方法

说明书

本发明涉及诊断领域。由于医药在疾病的治疗中实现了重大的进步，特别是通过将身体或器官的一部分用源自外部来源的部分取代来替换，现代医学治疗影响着越来越多的人。当身体特别是器官的一部分不能适宜发挥功能时，可以移植器官或通过人工元件替换身体的部分例如植入的牙。这类治疗经常引起身体的应答，其经常以炎症开始且可能最终导致移植物排斥。

EP 2 284 540A1披露了一种诊断器官衰竭的方法。该衰竭可能是炎症相关的(败血症)。所述方法描述了利用定量代谢组学概况(metabolomics profile)并将结果与一定量的内源代谢物的定量参照代谢组学概况比较。这背后的想法似乎是检测由于感染/败血症所致的器官衰竭。在该申请中，没有提到关于移植、排斥及其在唾液中的模式。

然而，本发明公开了一种检测和诊断早期炎症的方法。该方法描述了利用定量代谢组学概况并将结果与定量参照比较。这背后的想法似乎是从检测先天免疫应答的激活的意义上来检测早期炎性应答。该激活独特地见于几种疾病中，特别是在早期。这是在病原体或称为报警物(alarmin)的分子上的反应且导致炎性体(inflammasome)的激活。下一步是在至少6至7天后激活适应性免疫应答。

当植入物并非源自同一身体时，人体识别身体内植入的元件为不相容的。因此，必须仔细检查外来植入物和受体的相容性并小心监测可能的排斥作用。当移植实体器官如心脏、肝、肺、胰或肾时，通常可通过用药物适宜处理来下调受体身体的排斥作用。然而，不想要的副作用是，身体对移植物的应答下调经常同时导致免疫应答的下调。

因此，必须非常小心地监测接受移植物的患者的潜在的感染(例如细菌性或病毒性)，因为这类感染对于已接受移植物的患者可能是致命的。然而，对已接受移植物的人的复杂医学治疗具有的不想要的副作用是，患者未意识到感染和/或炎症的早期迹象。对移植物的排斥可能产生炎症，而患者由于移植后的医学治疗通常未识别早期阶段。患者仅会在更后期的阶段意识到他或她患有炎症，然而产生的不期望的后果是对患者开始进行适宜治疗以避免移植物排斥可能已太迟。因此，需要简单和可靠的体外方法来早期检测潜在的炎症，特别是检测对移植器官的潜在排斥。

本发明涉及犬尿氨酸(kynurenine)途径。色素是可经由不同路径代谢的基本氨基酸，其中一种主要路径是犬尿氨酸途径。该途径例示于图1。该途径的第一个酶，吲哚胺-2,3-双加氧酶，受炎性分子特别是干扰素-γ强烈刺激。如此，当免疫应答激活时，犬尿氨酸途径经常系统性上调。其生物学意义是在一方面，色氨酸的消耗和犬尿氨酸的生成在免疫应答中起着关键的调控作用。在另一方面，令人惊讶地发现在唾液中测量的犬尿氨酸水平可用于早期检测潜在的移植物排斥反应，其以其他方式是不能容易检出的。

色氨酸分解代谢中牵涉的主要酶吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO I)的活化生成免疫抑制性代谢物，其反向调节免疫活化。在显示IDO活性对于小鼠模型中半同种异源胎儿(semiallogeneic foetus)的免疫接受具有重要意见后，移植免疫学家对该控制环路的兴趣急剧增加。实验数据产生以下假说，即调节性T细胞通过启动IDO活性发挥其免疫抑制功能。这一基础性发现使得色氨酸代谢对于临床移植和不同疾病也具有意义(Chen等,Int.J.of Tryptophan Research 2009；2,1-19)。

用于早期测量和预测炎性形成的可靠的监测方法对于患者治疗有益。

目前已知曾经认为相对惰性的内皮牵涉多种功能，如纤维蛋白溶解、凝固作用、血管紧张度、生长和免疫应答。人体中最常见的反应可在由先天免疫介导的炎性应答中看到。

吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)，一种IFN-γ可诱导的胞内酶，催化犬尿氨酸途径中基本氨基酸色氨酸的降解中的第一且限速步骤。IDO的免疫调控效果由阻止T细胞增殖、促进T细胞凋亡、诱导T细胞忽略、无反应性、和T调节细胞的生成代表。虽然IDO显现为免疫调节物，但是其在控制同种异体应答(allo-response)中的作用正在展开中。