[发明专利]治疗性蛋白药物物质的整合连续制造

说明书

相关申请的交叉引用

本申请请求2013年3月8日提交的美国临时专利申请No.61/775,060和2013年7月19日提交的美国临时专利申请No.61/856,390的优先权，这两件申请的全部内容在本文通过提述并入。

技术领域

本发明涉及生物技术和生物制造重组蛋白的方法。

发明背景

含有编码重组蛋白的核酸的哺乳动物细胞常用于生产在治疗上或商业上重要的蛋白。在当前产品线多样化的环境下，越来越多地驱使生物技术公司开发出新的解决方案用于以高度灵活和成本有效的方式制造治疗性蛋白药物物质。

发明概述

至少在某种程度上，本发明是基于发现包括两个多重柱层析系统的整合连续系统可用于连续生产治疗性蛋白药物物质。由于该发现，本文提供用于制造治疗性蛋白药物物质的整合且连续的方法，其包括提供含有重组治疗性蛋白的基本上无细胞的液体培养基，其中将所述液体培养基进料入第一多重柱层析系统(MCCS1)；使用MCCS1捕获液体培养基中的重组治疗性蛋白，其中将含有所述重组治疗性蛋白的MCCS1的洗出液连续进料入第二多重柱层析系统(MCCS2)；并使用MCCS2纯化和精炼(polish)所述重组治疗性蛋白，其中MCCS2的洗出液是治疗性蛋白药物物质；且其中所述方法是整合的并从所述液体培养基连续地运行至MCCS2的洗出液，该洗出液为治疗性蛋白药物物质。还提供特别设计成实施本文所述任何方法的系统。例如，本文提供生物制造系统，其包括：含有入口的第一多重柱层析系统(MCCS)；以及含有出口的第二MCCS，其中该第一MCCS与第二MCCS彼此流体连通，且其中将所述制造系统配置成流体可通入该入口、通过该第一MCCS与第二MCCS，并且经由该出口离开所述制造系统。

本文提供用于制造治疗性蛋白药物物质的整合且连续方的法，其包括：(i)提供含有重组治疗性蛋白的基本上无细胞的液体培养基，其中将所述液体培养基进料入第一多重柱层析系统(MCCS1)；(ii)使用MCCS1捕获液体培养基中的重组治疗性蛋白，其中将含有该重组治疗性蛋白的MCCS1的洗出液连续进料入第二多重柱层析系统(MCCS2)；且(iii)使用MCCS2纯化和精炼该重组治疗性蛋白，其中MCCS2的洗出液为治疗性蛋白药物物质；且其中所述方法是整合的并从所述液体培养基连续地运行至MCCS2的洗出液，所述洗出液为治疗性蛋白药物物质。在本文所述任何方法的一些实施方案中，该液体培养基选自下组：由含有哺乳动物细胞的培养物的灌注生物反应器移出的液体培养基(所述哺乳动物细胞分泌重组治疗性蛋白)、由含有哺乳动物细胞的培养物的补料分批生物反应器移出的液体培养基(这些哺乳动物细胞分泌重组治疗性蛋白)，和来自分泌该重组治疗性蛋白的细菌或酵母细胞的培养物的经澄清的液体培养基。

在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS1和/或MCCS2实施至少两个不同的单元操作。在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS1或MCCS2或两者的使用涉及柱切换。在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS1实施捕获重组治疗性蛋白和灭活病毒的单元操作。在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS2实施纯化和精炼重组治疗性蛋白的单元操作。在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS1和/或MCCS2采用至少两个层析柱。在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS1和/或MCCS2采用至少两个层析膜。在本文所述任何方法的一些实施方案中，MCCS1和/或MCCS2采用至少一个层析柱以及至少一个层析膜。在本文所述任何方法的一些实施方案中，该液体培养基为由含有分泌该重组治疗性蛋白的哺乳动物细胞培养物的灌注生物反应器移出的液体培养基。