[发明专利]用于蛋白质表达的酵母启动子

权利要求书

1.一种分离核酸，其中所述分离核酸的序列包含与选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6的序列具有至少90%同一性，或与其片段具有至少90%同一性的序列，其中所述分离核酸包含甲醇-诱导性的巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)启动子序列。

2.权利要求1的分离核酸，其中所述分离核酸的序列与选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6的序列具有至少95%同一性，或与其片段具有至少95%同一性。

3.权利要求1的分离核酸，其中所述分离核酸的序列与选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6的序列具有至少98%同一性，或与其片段具有至少98%同一性。

4.权利要求1的分离核酸序列，其中所述分离核酸的序列为选自SEQIDNO:1、SEQIDNO:2、SEQIDNO:3、SEQIDNO:4、SEQIDNO:5和SEQIDNO:6的序列，或其片段。

5.权利要求1的分离核酸，与异源编码序列操作性连接。

6.权利要求5的分离核酸，其中所述异源编码序列编码选自毒素、抗体、激素、酶、生长因子、细胞因子、结构蛋白、免疫原性蛋白和细胞信号传导蛋白的蛋白质。

7.权利要求6的分离核酸，其中所述蛋白质为用于动物饲料的酶。

8.权利要求7的分离核酸，其中所述蛋白质选自甘露聚糖酶、淀粉酶、葡聚糖酶、蛋白酶、纤维素酶和木聚糖酶。

9.权利要求7的分离核酸，其中所述蛋白质为植酸酶。

10.权利要求7的分离核酸，其中所述蛋白质为半乳糖苷酶。

11.包含权利要求1的分离核酸的表达载体。

12.包含权利要求11的表达载体的宿主细胞。

13.包含权利要求1的分离核酸的宿主细胞。

14.权利要求12的宿主细胞，其中所述宿主细胞为毕赤酵母属(Pichia)物种。

15.权利要求14的宿主细胞，其中所述毕赤酵母属物种为巴斯德毕赤酵母。

16.包含权利要求1的分离核酸的DNA构建体。

17.生产蛋白质的方法，所述方法包括在培养基中培养含有包含权利要求1的分离核酸与编码蛋白质的异源编码序列操作性连接的第一个表达盒的宿主细胞的步骤，其中所述培养在允许该蛋白质表达的条件下进行。

18.权利要求17的方法，其中所述蛋白质选自毒素、抗体、激素、酶、生长因子、细胞因子、结构蛋白、免疫原性蛋白和细胞信号传导蛋白。

19.权利要求18的方法，其中所述蛋白质为用于动物饲料的酶。

20.权利要求19的方法，其中所述蛋白质选自甘露聚糖酶、淀粉酶、葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶和木聚糖酶。

21.权利要求19的方法，其中所述蛋白质为植酸酶。

22.权利要求19的方法，其中所述蛋白质为半乳糖苷酶。

23.权利要求17的方法，其中所述蛋白质使用第一个表达盒与第二个表达盒组合表达。

24.权利要求23的方法，其中所述第二个表达盒包含编码蛋白质的异源编码序列与具有包含SEQIDNO:15或SEQIDNO:16的序列或任何其它AOX1或AOX2启动子序列的序列的分离核酸操作性连接，其中SEQIDNO:15和SEQIDNO:16具有启动子活性。

25.权利要求24的方法，其中所述蛋白质使用第一个表达盒、第二个表达盒和第三个表达盒表达。