[发明专利]乙酰辅酶A羧化酶突变

权利要求书

1.一种经遗传修饰的微生物，其包含编码乙酰辅酶A羧化酶的两种或更多种亚基的异源核酸序列，其中所述两种或更多种亚基是融合的。

2.根据权利要求1所述的经遗传修饰的微生物，其中所述微生物能够将可再生碳源或碳源转化成3-羟基丙酸(3-HP)。

3.根据权利要求1所述的经遗传修饰的微生物，其中所述融合亚基包含accA-accB、accA-accC、accA-accD、accB-accC、accB-accD、accC-accD、accA-accB-accC、accA-accB-accD、accA-accC-accD、accB-accC-accD或accA-accB-accC-accD，或者由其组成。

4.根据权利要求1、2或3中的任一项所述的经遗传修饰的微生物，其中所述融合亚基在单个质粒上表达或者来自相同的核酸。

5.根据权利要求1、2、3或4中的任一项所述的经遗传修饰的微生物，还包含乙酰辅酶A羧化酶基因的至少一个非融合亚基。

6.根据权利要求1、2、3或4中的任一项所述的经遗传修饰的微生物，其中所述编码乙酰辅酶A羧化酶基因的基因编码accA-accC融合亚基、accB亚基和accC亚基。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的经遗传修饰的微生物，其中所述ACCase亚基相对于彼此的化学计量比介于0至约10之间。

8.根据权利要求7所述的经遗传修饰的微生物，其中所述ACCase亚基相对于彼此的所述化学计量比介于0.5至2之间、或介于7至9之间。

9.根据权利要求1-7中任一项所述的经遗传修饰的微生物，包括含有accA-accD融合亚基、accB非融合亚基和accC非融合亚基的生物体，其中B:A、B:C和B:D的摩尔比或比率为约7至约9，并且A:C、A:D和C:D的摩尔比或比率为约0.5至约2。

10.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的微生物，所述经遗传修饰的微生物在低表达、中等表达、高表达或可诱导表达载体中的一条多肽内提供两个、三个或四个ACCase亚基的融合体的表达。

11.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的微生物，其中：

a)accB和accC亚基与accA和accD亚基；

b)accA和accD亚基与accB和accC亚基；

c)accC和accD亚基与accA和accB亚基；

d)accA和accB亚基与accC和accD亚基；

e)accA亚基与accB亚基；

f)accB亚基与accA亚基；

g)accA亚基与accC亚基；

h)accC亚基与accA亚基；

i)accA亚基与accD亚基；

j)accD亚基与accA亚基；

k)accB亚基与accC亚基；

1)accC亚基与accB亚基；

m)accB亚基与accD亚基；

n)accD亚基与accB亚基；

o)accC亚基与accD亚基；或

p)accD亚基与accC亚基的化学计量比；

为1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、2:1、2:3、2:4、2:5、2:6、2:7、2:8、3:1、3:3、3:4、3:5、3:6、3:7、3:8、-3:1、-3:3、-3:4、-3:5、-3:6、-3:7、-3:8、-4:1、-4:3、-4:4、-4:5、-4:6、-4:7、-4:8、-5:1、-5:3、-5:4、-5:5、-5:6、5:7、5:8、6:1、-6:3、-6:4、-6:5、-6:6、-6:7、-6:8、-7:1、-7:3、-7:4、-7:5、-7:6、-7:7、-7:8、-8:1、-8:3、-8:4、-8:5、-8:6、-8:7或8:8。

12.根据权利要求1或2中任一项所述的经遗传修饰的微生物，包括含有accA-accD融合亚基、accB非融合亚基和accC非融合亚基的生物体，其中accA:accB:accC:accD的摩尔比或比率为约1:2:1:1。