[发明专利]O-磷酸丝氨酸输出蛋白及使用其生产O-磷酸丝氨酸的方法

权利要求书

1.生产O-磷酸丝氨酸(OPS)的方法，其包括培养生产O-磷酸丝氨酸的微生物，所述微生物的、具有O-磷酸丝氨酸输出活性的、由SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列组成的多肽的活性与野生型微生物的多肽活性相比增强。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生产O-磷酸丝氨酸的微生物，与野生型微生物的多肽的活性相比，进一步具有降低的内源性磷酸丝氨酸磷酸酶活性。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述生产O-磷酸丝氨酸的微生物，与野生型微生物的多肽的活性相比，进一步具有增强的磷酸甘油酸脱氢酶或磷酸丝氨酸氨基转移酶活性。

4.生产O-磷酸丝氨酸的微生物，所述生产O-磷酸丝氨酸的微生物的、具有O-磷酸丝氨酸输出活性的、由SEQ ID NO:1或2的氨基酸序列组成的多肽的活性与野生型微生物的多肽活性相比增强。

5.权利要求4所述的微生物，其中所述微生物进一步具有与野生型微生物的多肽的活性相比降低的内源性磷酸丝氨酸磷酸酶活性。

6.根据权利要求4所述的微生物，其中所述微生物进一步具有与野生型微生物的多肽的活性相比增强的磷酸甘油酸脱氢酶或磷酸丝氨酸氨基转移酶活性。

7.生产半胱氨酸或半胱氨酸衍生物的方法，其包括以下步骤：

a)培养权利要求4至6中任一项所述的微生物，以生产O-磷酸丝氨酸(OPS)；和

b)在O-磷酸丝氨酸硫化氢解酶(OPSS)或表达OPSS的微生物的存在下，使步骤a)中生产的所述O-磷酸丝氨酸与硫化物反应，

其中所述半胱氨酸衍生物是NAC(N-乙酰半胱氨酸)、SCMC(S-羧甲基半胱氨酸)、BOC-CYS(ME)-OH、(R)-S-(2-氨基-2-羧乙基)-L-高半胱氨酸、(R)-2-氨基-3-磺基丙酸、D-2-氨基-4-(乙硫基)丁酸、3-亚磺基-L-丙氨酸、Fmoc-cys(Boc-甲基)-OH、硒基-L-胱氨酸、S-(2-噻唑基)-L-半胱氨酸、S-(2-噻吩基)-L-半胱氨酸、或S-(4-甲苯基)-L-半胱氨酸。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述硫化物是选自Na₂S、NaHS、(NH₄)₂S、H₂S和Na₂S₂O₃的一个或多个。