[发明专利]用于改善植物中化学信号扩散的方法及组合物

权利要求书

1.一种重组多核苷酸构建体，所述重组多核苷酸构建体包括：

(a)有效连接至在植物中有活性的第一阻抑型启动子的所关注多核苷酸，其中所述第 一阻抑型启动子包含至少一个操纵基因；

(b)编码化学调节转录阻遏物并有效连接至在所述植物中有活性的启动子的多核苷 酸；以及

(c)有效连接至第二阻抑型启动子的基因沉默构建体，其中所述基因沉默构建体编码 可减少所述化学调节转录阻遏物的沉默元件，其中所述第二阻抑型启动子包含至少一个操 纵基因，并且其中所述化学调节转录阻遏物可在不存在化学配体的情况下结合至每一个所 述操纵基因，从而在不存在所述化学配体的情况下抑制从所述第一阻抑型启动子和所述第 二阻抑型启动子的转录。

2.根据权利要求1所述的重组多核苷酸构建体，其中

(i)有效连接至所述所关注多核苷酸的所述第一阻抑型启动子包含三个所述操纵基 因；并且/或者

(ii)有效连接至编码所述化学调节转录阻遏物的所述多核苷酸的所述启动子包含第 三阻抑型启动子，其中所述第三阻抑型启动子包含至少一个操纵基因；并且/或者

(iii)有效连接至所述基因沉默构建体的所述第二阻抑型启动子包含三个所述操纵基 因。

3.根据权利要求2所述的重组多核苷酸构建体，其中有效连接至编码所述化学调节转 录阻遏物的所述多核苷酸的所述第三阻抑型启动子包含两个操纵基因。

4.根据权利要求2所述的重组多核苷酸构建体，其中有效连接至编码所述化学调节转 录阻遏物的所述多核苷酸的所述第三阻抑型启动子包含三个操纵基因。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的重组多核苷酸构建体，其中编码所述化学调节转 录阻遏物的所述多核苷酸是由磺酰脲类化合物调节的。

6.根据权利要求5所述的重组多核苷酸构建体，其中所述磺酰脲类化合物包括嘧啶基 磺酰脲类化合物、三嗪基磺酰脲类化合物、噻二唑基脲类化合物、氯磺隆、胺苯磺隆、噻吩磺 隆、甲磺隆、甲嘧磺隆、苯磺隆、氯嘧磺隆、烟嘧磺隆或砜嘧磺隆化合物。

7.根据权利要求1-4中任一项所述的重组多核苷酸构建体，其中编码所述化学调节转 录阻遏物的所述多核苷酸是由四环素调节的。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的重组多核苷酸构建体，其中所述基因沉默构建体 编码降低所述化学调节转录阻遏物的细胞非自发的沉默元件。

9.根据权利要求1-7中任一项所述的重组多核苷酸构建体，其中所述沉默元件包括 siRNA、反式作用siRNA(TAS)或amiRNA。

10.根据权利要求1-7中任一项所述的重组多核苷酸构建体，其中所述沉默元件包含发 夹RNA。

11.根据权利要求10所述的重组多核苷酸构建体，其中包含所述沉默元件的所述基因 沉默构建体依次包含第一片段、第二片段和第三片段，其中

(a)所述第一片段包含与编码所述化学调节转录阻遏物的多核苷酸具有至少90％的序 列互补性的至少约20个核苷酸。

(b)所述第二片段包含足够长度的环，以允许所述沉默元件作为发夹RNA进行转录；并 且，

(c)所述第三片段包含与第一片段具有至少85％的互补性的至少约20个核苷酸。