[发明专利]用于制备糖和糖浆的方法

权利要求书

1.一种用于产生糖浆的方法，该方法包括：

a)用α-淀粉酶变体液化水性颗粒状淀粉浆液，该α-淀粉酶变体在对应于SEQIDNO:1的以下任何位置的一个或多个位置处包括改变：1、2、68、71、126、133、142、144、156、158、176、185、201、205、213、239、279、316、318、360、416、437以及450，以提供包含液化淀粉的材料；

b)在葡糖淀粉酶和来源于脱支芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、淀粉脱支芽孢杆菌或嗜酸性普鲁兰芽孢杆菌的普鲁兰酶的存在下糖化该包含液化淀粉的材料以提供右旋糖糖浆，并且任选地

c)进行异构化以提供果糖糖浆。

2.如权利要求1所述的方法，其中以约0.0001-3mg酶蛋白/克干固体，例如0.0005-2mgEP/gDS，优选0.001-1mg/gDS，更优选0.005-0.5mgEP/gDS，并且甚至更优选0.005-0.006mgEP/gDS酶蛋白/克干固体的量添加该α-淀粉酶变体。

3.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该α-淀粉酶变体在SEQIDNO:1的位置176和/或185，优选位置176和位置183处包括取代，更优选K176L+E185P。

4.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该α-淀粉酶变体在SEQIDNO:1的位置176、185、360和/或437中的一个或多个，优选位置176+185+360+437处包括取代，更优选K176L+E185P+Q360S+R437W。

5.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该普鲁兰酶是来源于脱支芽孢杆菌。

6.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该淀粉浆液具有20％-55％的干固体颗粒状淀粉，优选25％-40％的干固体颗粒状淀粉，更优选30％-35％的干固体，尤其是33％左右的干固体颗粒状淀粉。

7.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该颗粒状淀粉的干固体的至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或至少99.5％被转化为糖浆，例如右旋糖糖浆或果糖糖浆。

8.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该颗粒状淀粉是获得自块茎、根、茎或整谷物。

9.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该颗粒状淀粉是获得自谷类。

10.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该颗粒状淀粉是获得自玉米、玉米芯、小麦、大麦、黑麦、买罗高粱、西米、木薯、木薯淀粉、高粱、稻或马铃薯。

11.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中该颗粒状淀粉是获得自整谷物的干磨或获得自整谷物的湿磨。

12.如以上权利要求中任一项所述的方法，进一步包括在该糖化步骤b)过程中添加α-淀粉酶变体，该α-淀粉酶变体在对应于SEQIDNO:1的以下任何位置的一个或多个位置处包括改变：1、2、68、71、126、133、142、144、156、158、176、185、201、205、213、239、279、316、318、360、416、437以及450。

13.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤a)、步骤b)或其组合中添加该α-淀粉酶变体与没有该α-淀粉酶变体的情况下的类似反应相比产生更多的DP1产物。

14.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤a)、步骤b)或其组合中添加该α-淀粉酶变体与没有该α-淀粉酶变体的情况下的类似反应相比产生减少的DP4+产物。

15.如以上权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤a)、步骤b)或其组合中添加该α-淀粉酶变体与没有该α-淀粉酶变体的情况下的类似反应相比产生减少的DP2产物。