[发明专利]大豆转化过程中非种系事件的早期检测和去除

权利要求书

1.一种鉴定大豆种系转化子的方法，包括下述步骤：

(a)用转基因转化大豆植物组织；

(b)从经转化的包含转基因的大豆植物组织再生芽；

(c)从该包含转基因的经转化的大豆植物组织分离再生芽；

(d)将分离的再生芽与膜接触，其中植物材料从该分离的再生芽被转移到并固定于该膜，该植物材料包含所述经转化的包含转基因的大豆植物组织；

(e)测定该转移的植物材料以确定所述转基因在该转移的植物材料中的位置；

(f)确定所述分离的再生芽内的转基因位置，其中该转基因位置选自下组：L2/L3组织层，以及L1组织层；和

(g)将显示L2/L3组织层转基因位置的分离的再生芽鉴定为大豆种系转化子。

2.一种从权利要求1的大豆种系转化子再生成熟的转基因大豆植物的方法，包括：

(a)选择包含所述大豆种系转化子的分离的再生芽；和

(b)将该包含所述大豆种系转化子的分离的再生芽培养成为成熟的转基因大豆植物。

3.权利要求1的方法，其中所述转化采用选自下组的转化方法：土壤杆菌转化、生物射弹、磷酸钙转化、聚凝胺转化、原生质体融合转化、电穿孔转化、超声转化、脂质体转化、显微注射转化、裸DNA转化、质粒载体转化、病毒载体转化、碳化硅介导转化、气溶胶聚束转化、或PEG转化。

4.权利要求1的方法，其中所述大豆植物组织选自下组：分生性大豆植物组织、皮性大豆植物组织、基本大豆植物组织、和维管大豆植物组织。

5.权利要求4的方法，其中所述分生性大豆植物组织包括顶端分生组织、初生分生组织、或侧生分生组织。

6.权利要求4的方法，其中所述皮性大豆植物组织包括表皮。

7.权利要求4的方法，其中所述皮性大豆植物组织包括周皮。

8.权利要求4的方法，其中所述维管大豆植物组织选自木质部或韧皮部。

9.权利要求1的方法，其中所述转基因包含在至少一个基因表达盒中。

10.权利要求9的方法，其中所述基因表达盒包含选择标志物基因。

11.权利要求9的方法，其中所述基因表达盒包含性状基因。

12.权利要求9的方法，其中所述基因表达盒包含RNAi基因。

13.权利要求1的方法，其中所述分离包括对所述芽进行横向水平切割。

14.权利要求1的方法，其中所述膜包括硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚四氟乙烯膜、或聚偏二氟乙烯膜。

15.权利要求1的方法，其中所述测定包括蛋白质检测测定。

16.权利要求15的方法，其中所述蛋白质检测测定包括特异性结合从所述转基因表达的蛋白质的抗体。

17.权利要求1的方法，其中所述确定包括识别固定在所述膜上的转移的植物材料内的点样式。

18.权利要求1的方法，其中所述确定包括识别固定在所述膜上的转移的植物材料内的环样式。