[发明专利]用于脐带血收集及细胞分离的细胞、方法和装置

权利要求书

提供以下典型权利要求是为了进一步解释本发明的一些实施例，不应被理解为申请人视为其发明的范围限制。

我们要求：

1.用于分离内皮细胞的方法，包括：

(a)将脐带血样品平铺在一个表面上；和

(b)使所述脐带血样品中的细胞附着在所述表面上，所述附着细胞包括所述内皮细胞。

2.用于分离内皮细胞和造血祖细胞的方法，包括：

(a)将脐带血样品平铺在表面上；

(b)使所述脐带血样品中的细胞附着在所述表面上；

(c)将未附着的细胞与所述附着的细胞分离，所述附着细胞包括所述内皮细胞，所述未附着细胞包括所述造血祖细胞。

3.根据权利要求2所述的方法，所述步骤(c)不会引起明显的所述附着细胞脱离所述表面。

4.根据权利要求2所述的方法，经过步骤(c)后，至少大约10％，大约20％，大约30％，大约40％，大约50％，大约60％，大约70％，大约80％，或大约90％的所述附着细胞仍然附着在所述表面上。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，所述脐带血样品来自人类。

6.根据权利要求1-5任一所述的方法，所述脐带血样品是新收集的。

7.根据权利要求1-5任一所述的方法，所述脐带血样品是冷冻的。

8.根据权利要求1-7任一所述的方法，所述脐带血样品被处理用于单核细胞富集。

9.根据权利要求1-7任一所述的方法，所述脐带血样品不进行处理用于单核细胞富集。

10.根据权利要求1-9任一所述的方法，所述脐带血样品被处理用于造血祖细胞和/或造血干细胞富集。

11.根据权利要求1-9任一所述的方法，所述脐带血样品不进行处理用于造血祖细胞和/或造血干细胞富集。

12.根据权利要求1-11任一所述的方法，在大约0℃至大约37℃的温度下平铺所述脐带血样品。

13.根据权利要求1-12任一所述的方法，用I型胶原蛋白，或凝胶，或类似的细胞外基质成分，或其任意组合来包被所述表面。

14.根据权利要求1-13任一所述的方法，使所述脐带血样品中的细胞附着在所述表面大约5分钟，大约10分钟，大约15分钟，大约20分钟，大约25分钟，大约30分钟，大约35分钟，大约40分钟，大约45分钟，大约50分钟，大约55分钟，大约60分钟或更长时间。

15.根据权利要求1-14任一所述的方法，还包括提供维持造血细胞生存能力、原始状态和/或再生能力的合适条件。

16.根据权利要求1-15任一所述的方法，还包括提供维持内皮细胞生存能力和/或原始状态的合适条件。

17.生产干细胞或祖细胞的方法，包括重组权利要求1-16任一分离的内皮细胞形成干细胞或祖细胞。

18.获得干细胞或祖细胞的方法，包括扩增权利要求2-16任一方法中所分离到的造血祖细胞，任选地：(1)从所述扩增的造血祖细胞群分离更原始的细胞，或(2)重组所述造血祖细胞形成干细胞或祖细胞。

19.产生体细胞的方法，包括：

(a)重组权利要求1-16任一方法分离到的内皮细胞形成干细胞或祖细胞，并使所述干细胞或祖细胞分化为体细胞；或

(b)直接将权利要求1-16任一方法分离到的内皮细胞重组为体细胞。

20.用于从脐带血中分离细胞的双容器装置，包括两个容器和用于在容器间运输细胞悬浮液的具有活塞流量调节的无菌管道。

21.根据权利要求20所述的双容器装置，还包括附在封闭系统中便于清洗步骤和细胞转运至容器的具有活塞流量调节的介质室。

22.根据权利要求20或21所述的双容器装置，还包括一个或多个便于向容器中添加冷冻保护剂的附加室。

23.根据权利要求20-22任一所述的双容器装置，所述装置预充有含氧量低的、含氧量正常的或含氧量高的气体。