[发明专利]用于分离核酸的系统和方法

说明书

本申请要求于2013年3月13日提交的临时专利申请序列号61/780,236的优先权，该临时申请通过引用以其整体结合到本文中。

发明领域

本公开内容涉及用于核酸分离的系统和方法。特别地，本公开内容提供用于从体液(例如，血浆)分离低分子量循环核酸的系统和方法。

发明背景

细胞中存在的核酸可为脱氧核糖核酸或核糖核酸，并且可为基因组DNA、染色体外DNA(例如，质粒和附加体)、线粒体DNA、信使RNA、miRNA和转移RNA。核酸还可为对于宿主外源的并作为传染剂，例如细菌、病毒、真菌或单细胞有机体和传染性多细胞有机体(寄生虫)污染细胞。近来，核酸存在情况的检测和分析对单核苷酸多态性(SNP)、染色体重排、外源基因插入和核酸甲基化状态变更的鉴定变得重要。这些包括传染性病毒例如HIV和其它反转录病毒、跳跃基因例如转座子以及经重组工程改造的包含外源基因的有机体，例如RoundupReady植物的核酸的鉴定。

核酸分析具有一系列广泛的用途。例如，外源剂的存在情况可用作医学诊断工具。癌组织基因组成的鉴定也可用作医学诊断工具，证实该组织为癌性的，并确定癌组织的侵袭性质。染色体重排、SNP和基因表达中的异常变更可用作特定疾病状态的医学诊断。此外，遗传信息可用于查明特定药物的效力，这是药物基因组学领域所知的。

从细胞提取核酸的方法为本领域技术人员所熟知。细胞壁可通过多种方法削弱，以允许核酸从细胞挤出并允许其进一步纯化和分析。核酸提取的具体方法取决于待分离核酸的类型、细胞类型和用于分析核酸的具体应用。本领域技术人员已知多种分离DNA的方法，参见例如通用参考资料Sambrook和Russell,2001,"MolecularCloning:ALaboratoryManual.(分子克隆：实验室手册)"。例如，现有技术包括用于从体液提取和分离DNA的化学浸渍和脱水固体-基质的例子，其使用溶解盐和洗涤剂并包含用于DNA样品长期储存的额外试剂，例如详述FTA纸的美国专利号5,807,527和详述Isocard纸的美国专利号6,168,922。现有领域还包括颗粒分离方法的例子，例如，U.S.RE37,891。

尽管许多核酸纯化程序已为人所熟知并且存在多年，但这些程序可为耗时的并且可能使用对进行纯化的人存在危险的试剂。例如，人们早已知道DNA可以使用有机提取程序以纯化的形式从检验样品容易地获得，但这样的程序可需要若干次提取因此可为耗时的。此外，一些有机溶剂的使用是不合需要的，并且如果没有遵照适当的防护措施是有危险的。

因此，存在对高效、有力和方便的用于从细胞分离核酸和(例如，从体液)制备用于分析的无细胞核酸的方法的需求。

发明概述

本公开内容涉及用于核酸分离的系统和方法。特别地，本公开内容提供用于从体液(例如，血浆)分离低分子量循环核酸的系统和方法。