[发明专利]与溶酶体贮积症的测试相关的化合物和方法

说明书

相关申请的交叉引用

本申请取决于2013年3月15如提交的美国临时申请第61/789,985号且要求所述申请的优先权，所述申请的内容以全文引用的方式并入本文中。

技术领域

本说明书涉及检测酶活性以检测溶酶体酶活性的分析型试剂。

背景技术

溶酶体贮积症为一组遗传性病症，其特征为身体中缺乏特定酶，导致身体不能分解代谢物质。举例来说，法布立病(Fabrydisease)为每40,000人中见于一人的溶酶体贮积症。其由酶α-半乳糖苷酶的缺乏造成，所述缺乏导致身体不能分解称作神经酰胺三己糖苷(globotriaosylceramide)的特定脂肪物质。第二实例为戈谢病(Gaucherdisease)，由不能分解称作葡糖神经酰胺(也被称为葡糖脑苷脂)的脂肪物质或脂质造成的溶酶体贮积症。患有戈谢病的个体不制造葡糖脑苷脂酶，分解这些脂肪物质所需的酶。这些脂肪物质随后积聚在肝、脾和骨髓细胞中。第三实例为蓬佩病(Pompedisease)，由缺乏分解某些称作肝糖的糖所需的酶酸性α-葡糖苷酶造成的溶酶体贮积症。当酶酸性α-葡糖苷酶缺失时，肝糖积聚在身体中的各种组织和器官中。

溶酶体贮积症主要为儿童病症，尽管一些显现在成人期。在大部分所述病症中，患者在出生时正常且在一些时间以后开始具有进展性神经恶化。临床表现型取决于生化缺陷的类型和严重程度。这些溶酶体病症中的一些，如蓬佩病和克拉培病主要显现于婴儿期。已持续努力开发在临床症状发作之前检测此类病症以使得可以起始治疗性干预的方法。

在过去的十年里，测试代谢病症的实验室已将串联质谱引入到其新生儿筛选程序中。串联质谱持续在诊所中受到欢迎，因为此技术允许在单一样品中检定多种代谢物。举例来说，此技术已实施为使用干燥血点样品检测新生儿中的遗传代谢病症的常规临床实践。尽管溶酶体酶活性可以使用串联质谱定量，但由于可溶性问题和并入外标的需要，公布的检定方法已略微难以适应临床配置。

因此，仍需要用于检测溶酶体病症的改进的方法和组合物。

发明内容

提供以下发明概述以促进对本发明特有的创新性特征中的一些的理解且不打算为完整描述。本发明的各种方面的完整理解可以通过将整个说明书、权利要求书、附图和摘要作为整体来获得。

提供使用如质谱的检测系统检测酶促反应的改进的组合物和方法。这些组合物提供在水性溶剂系统中的提高的可溶性和/或与目标酶的提高的反应性，进而提高检定效率、再现性和精确性。

本发明提供适用于评估样品中的溶酶体酶活性水平的化合物。测试溶酶体酶活性例如在新生儿中筛选代谢病症时以及在评估具有影响酶活性的医学病况的个体或经历如替代疗法、基因疗法或骨髓移植的医学治疗的个体时适用。本文所述的化合物包括用于目标酶的底物和适用作酶检定中的对照物或标准物的相关分子。

本发明的一个目标为提供适合于检测酶，说明性地由于缺乏而导致溶酶体贮积症的酶的活性的底物。提供具有以下通式的底物：