[发明专利]抗-TNF-α/CXCL10双靶向抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及与肿瘤坏死因子α(TNF-α)和C-X-C基序趋化因子10(CXCL10)特异性结合的TNF-α/CXCL-10双靶向抗体及其应用。

相关专利申请

本申请要求于2013年5月22日提交的韩国专利申请10-2013-0057475和10-2013-0057762的优先权和权益，通过参考将其公开内容整体上并入本文。

背景技术

通常而言，抗体通过下述过程形成：将具有高分子量的重链多肽与具有低分子量的轻链多肽通过二硫键连接而形成异二聚体，并再次通过二硫键将两个异二聚体连接而形成四聚体。形成重链的多肽由四个域组成，其从N末端起包括可变域、恒定域1、恒定域2和恒定域3，形成轻链的多肽由两个域组成，其从N末端起包括可变域和恒定域。其中，重链的可变域与轻链的可变域的缀合物与一种抗原结合。

作为用于标记细胞的化学标志物的抗原与针对该抗原的抗体之间的反应显示出高度特异性。与抗体相互作用的抗原部位称为抗原决定簇或表位，抗原决定簇与抗体的抗原结合部位(其是可变域)特异性结合。因此，由于抗原结合部位可以仅与一种抗原决定簇结合，许多抗体各自可以提供针对具有特异性决定簇的抗原的独特免疫性。

抗体在血液中具有高度稳定性和低的免疫原性，因此作为药物引起关注。这些抗体中，存在能够识别两种类型的抗原的双特异性抗体。双特异性抗体可以分为两种主要类型。第一种双特异性抗体通过重组DNA技术改造而具有能够与两种不同抗原结合的抗原结合部位，并且在该情况下，一种结合部位可以对任一抗原具有特异性，另一种可以是对另一抗原具有特异性并且同时与两种抗原结合(BeckA等,NatRevimmunology10；345-352,2010)。第二种双特异性抗体是最近开发的正常抗体，其具有一个抗原结合部位和能够与两种不同抗原结合的能力，被称为二合一抗体(two-in-oneantibody)(Bostrom,J等,Science323,1610-1614,2009)。由于此类二合一抗体具有一个抗原结合部位，其可以每次与一种抗原结合，而不是与两种抗原结合，但是具有与两种不同抗原结合的能力。二合一抗体具有已经成功地开发的典型抗体的形式，其对于开发非常有利。

由于此类双特异性抗体可以通过与特定的毒性细胞和靶细胞结合而发挥作用，其具有高度靶标特异性。

随着对类风湿性关节炎的病理生理学的理解不断加深，从二十世纪90年代后期起用于通过由新开发的抗风湿药阻断高度靶向物质而调节疾病的靶向疗法的概念变得重要。结果，由于开发并使用了通过设计发现作为针对特定疾病的靶标并能够阻断靶标的物质而形成的生物药物，它们给治疗类风湿性关节炎带来很大变化。这些药物代表性地包括白细胞介素-6拮抗剂(妥珠单抗)、CTLA4Ig(阿巴西普)和B细胞耗竭剂(depletingagent)(利妥昔单抗)以及TNF-α抑制剂(依那西普、英夫利昔单抗、阿达木单抗等)和重组白细胞介素-1受体拮抗剂，例如阿那白滞素，并且在临床上或测试中实际使用。

针对患者中的肿瘤和脓毒症的TNF-α(肿瘤坏死因子-α)的研究已经从约100年之前开始。TNF-α由巨噬细胞、包括B和T淋巴细胞在内的免疫细胞、非免疫细胞和各种肿瘤细胞产生，并且在正常的生理炎性响应和获得性或先天性免疫中起重要作用。但是，在诸如类风湿性关节炎等炎性疾病中，当TNF-α不适当地过度产生时，免疫系统的各种细胞被激活从而诱导细胞毒性效应，并且出现诸如炎症、组织破坏以及器官损伤等反应。TNF-α的主要生物作用是调节各种细胞类型的生长、分化和代谢；刺激脂肪细胞中存在的脂蛋白脂肪酶的脂解和活性的抑制，以及通过刺激肝脂肪生成而诱导恶病质；并且诱导凋亡。TNF-α以游离形式或细胞膜结合形式存在。这两种形式的TNF-α非常强烈地诱导细胞的炎性响应，并且刺激组织中的疾病状态。细胞膜结合TNF-α通过细胞间接触展示细胞毒性和炎性功效，并且通过TNF-α转化酶(TACE)从细胞膜上脱附，并存在于细胞外。该TNF-α与血液中的两种受体之一(例如TNFI型受体(p55)或TNFII型受体(p75))结合，由此展示生物活性。临床上，过度产生的TNF-α产生刺激类风湿性关节炎患者中的巨噬细胞和放大炎性响应的炎性介体，表达附着至血管内皮细胞上的附着分子以使更多的炎性细胞聚集在炎性部位，并且允许成纤维细胞产生蛋白酶，导致软骨、骨和韧带损伤，由此使疾病恶化。