[发明专利]微生物的检查方法

说明书

一种微生物的检查方法，其具有试样调制工序，所述试样调制工序包括：将一定量的试样及所述荧光染色试剂搅拌、混合的荧光染色工序；将该荧光染色工序后的溶液静置一定时间的静置工序；及以不发出荧光的液体稀释该静置工序后的溶液的稀释工序。

技术领域

本发明涉及一种微生物的检查方法，特别是涉及适于检测包含在压载水等中而存活的浮游生物等微生物的微生物的检查方法。

背景技术

未搭载货物的船舶为了使该船舶稳定而搭载压载水航行，在搭载货物的海域将上述压载水排出。

压载水通常在与搭载的海域不同的海域排出，因此有可能将该压载水所含有的浮游生物、细菌等微生物搬运至原来的栖息地以外的海域，引起破坏生态系等问题。

为了解决这样的问题，制定与压载水的限制有关的国际规则，通过了“用于限制并管理船舶的压载水及沉殿物的国际条约(压载水管理条约)”。

就与上述压载水管理条约相关的“关于压载水采样的指标(G2)”而言，在“压载水排出基准(D-2)”中，将从船舶排出的压载水所含有的存活的微生物的允许个体数根据所述微生物的最小尺寸区分而规定的，例如，关于最小尺寸50μm以上的微生物(以下，称为“L尺寸生物”。)，规定为10个/m³以下，关于最小尺寸为10μm以上且小于50μm的微生物(以下，称为“S尺寸生物”。)，规定为10个/mL以下。

目前为止，作为排出上述压载水时用于确认是否满足上述排出基准的方法，已知如下微生物检查装置：专利文献1所记载的使以送水泵抽取的海水通过流动池而测量图像的微生物检查装置专利文献2所记载的使以送水泵抽取的海水通过网眼不同的滤波器单元，使滤波器上的微生物发光，计算微生物的微生物检查装置等。

上述专利文献1所记载的微生物检查装置，包含：染色部，在使液体检测物流动的同时，使存在于该检测物中具有活细胞的生物染色；浓缩部，在使所述经施行染色的检测物流动的同时，进行浓缩，以提高所述生物的浓度；个体测量部，取得所述经浓缩的检测物中包含所述生物的个体的图像信息；及控制机构，根据由所述个体测量部输出的所述个体的图像信息，测定该生物。

由此，可以以流动方式进行检测物液体中生物的染色工序、液体中生物的浓缩工序，液体中生物的信息获取的工序等，因此与以分批方式进行各方式的方法相比，能够大幅缩短一个工序结束的检测物的一部分进展至下一个工序为止的待机时间，或使其为0，防止在待机时间染色的状态劣化，从该意义来讲，具有能够稳定取得生物生死的信息的优点。

然而，上述专利文献1所记载的微生物检查装置，使由送水泵抽取的海水依次通过各种工序，从而存在装置庞大、且制造成本高的问题。此外，虽然依次通过各种工序而缩短待机时间，但存在直到测定结束为止至少需耗费数小时这样的问题。

此外，上述专利文献2所记载的微生物检查装置的特征在于，具备如下工序：使海水通过将网眼不同的3种滤波器串联配置而成的滤波器单元的工序；产生由滤波器捕获且存活的微生物造成的发色、发光及荧光中任一者的工序；及检测发色、发光及荧光中任一者，利用图像分析计算压载水或海水中的微生物数的工序。

由此，能够实现阶段性地捕捉每一尺寸的微生物，其结果，具有能够迅速测定是否满足按每一尺寸的基准限制的允许残存基准这样的优点。

然而，专利文献2所记载的微生物检查装置也与专利文献1同样，使以送水泵抽取的海水依次通过各种工序，从而具有装置庞大、制造成本高的问题。

在此，鉴于上述问题，本申请人通过专利文献3提出一种微生物的检查方法，该微生物的检查方法通过利用分批式的测定池，能够简便地且在短时间内，并以高精度测定压载水中微生物的量。