[发明专利]流行性感冒病毒疫苗及其用途

说明书

本发明提供多种流行性感冒血球凝集素主干域多肽，这些多肽包括(a)流行性感冒血球凝集素HA1域，该HA1域包括HA1 N‑末端主干区段，该HA1 N‑末端主干区段包括从该HA1域的位置1至位置x、优选地从位置p至位置x的氨基酸，并通过具有0‑50个氨基酸残基的连接序列共价连接至HA1C‑末端主干区段，该HA1 C‑末端主干区段包括从该HA1域的位置y的氨基酸至C‑末端氨基酸并且包括该C‑末端氨基酸，以及(b)流行性感冒血球凝集素HA2域，其中该血球凝集素主干域多肽对在HA1和HA2之间的接合点处的蛋白酶切割具有抗性，并且其中相比于野生型流行性感冒HA中的对应位置，在位置337、340、352、353、402、406、409、413和/或416处的氨基酸的一个或多个氨基已经突变。

引言

本发明涉及医学领域。此处提供了多种流行性感冒血球凝集素主干域多肽，提供多种血球凝集素主干域多肽的方法，包括这些多肽的组合物，包括这些多肽的疫苗及其使用方法，特别是在流行性感冒的检测、预防和/或治疗中的使用。

背景

流行性感冒病毒是主要的人病原体，引起呼吸系统疾病(通常称为“流行性感冒”或“流感”)，其严重性范围为从亚临床感染至可导致死亡的原发性病毒性肺炎。感染的临床影响随着流行性感冒株的毒力和宿主的暴露、病史、年龄、以及免疫状态而变化。全世界每年估计大约10亿的人经受流行性感冒病毒感染，导致3-5百万例严重疾病以及估计300,000至500,000例流行性感冒相关死亡。这些感染大多数可能归因于携带H1或H3血球凝集素亚型的甲型流行性感冒病毒，较少程度由乙型流行性感冒病毒促成，并且因此所有三种的代表包括在季节性疫苗中。当前免疫实践依赖于流行的流行性感冒病毒的早期鉴别以允许及时生产有效的季节性流行性感冒疫苗。除了在预测将在下一季中占主导的毒株方面的固有困难之外，抗病毒耐受性以及免疫逃逸也在当前疫苗在防止发病率和死亡率上的失败中发挥作用。除此外，由起源于动物贮器的高毒力病毒株引起大流行并且重配而增加人与人传播的可能性构成了对全球健康的显著且现实的威胁。

甲型流行性感冒病毒广泛分布于自然中并且可感染多种鸟类以及哺乳动物。流行性感冒病毒是属于正粘病毒科的包膜RNA病毒。其基因组由八个单链RNA区段组成，这些区段编码11种不同的蛋白、一种核蛋白(NP)、三种聚合酶蛋白(PA、PB1、以及PB2)、两种基质蛋白(M1以及M2)、三种非结构性蛋白(NS1、NS2、以及PB1-F2)、以及两种外膜糖蛋白：血球凝集素(HA)以及神经氨酸酶(NA)。这些病毒是基于HA以及NA蛋白的抗原结构的区别而分类的，其不同组合表示独特的病毒亚型，这些亚型进一步被分类为特异的流行性感冒病毒株。尽管所有已知的亚型都可以在鸟类中发现，当前流行的人甲型流行性感冒亚型是H1N1以及H3N2。系统发育分析已证实血球凝集素细分为两个主要的组：尤其在系统发育组1中的H1、H2、H5以及H9亚型，以及尤其系统发育组2中的H3、H4以及H7亚型。

乙型流行性感冒病毒株是严格地针对人的。乙型流行性感冒病毒株内的HA中的抗原变化小于甲型株内观察到的那些。乙型流行性感冒病毒的两个遗传上和抗原性上不同的谱系在人中流行，如由B/山形/16/88(也称为B/山形)以及B/维多利亚/2/87(B/维多利亚)谱系(弗格森(Ferguson)等人，2003)代表的。尽管由乙型流行性感冒病毒引起的疾病的光谱通常比由甲型流行性感冒病毒引起的更加温和，仍频繁观察到需要住院治疗的严重疾病具有乙型流行性感冒感染。

已知中和该流行性感冒病毒的抗体主要针对血球凝集素(HA)。血球凝集素或HA是一种三聚体糖蛋白，其被锚定到病毒衣并且具有双功能：它负责结合到细胞表面受体唾液酸并且摄取之后它介导病毒和内涵体膜的融合，导致在该细胞的胞液中释放病毒RNA。HA包括大的头部域以及较小的主干域。附接至该病毒膜是通过连接至该主干域的C-末端锚定序列介导的。该蛋白在指定的环中被翻译后切割以产生两种多肽，即HA1和HA2(全长序列被称为HA0)。膜远端头部区主要源自于HA1，并且膜近端主干区主要来自HA2(图1)。