[发明专利]用omega-3甘油酯再灌注促进对用于移植的供体器官的保护

说明书

发现相对于没有用omega‑3甘油酯油进行的灌注/再灌注，离体器官和组织用添加有omega‑3甘油酯油的灌注缓冲液进行灌注/再灌注时能够维持更高水平的功能。与对照心脏相比，离体心脏在诱导缺血后用n‑3甘油三酯灌注乳剂体外再灌注维持了正常的心率和正常的LVDP，并显示了显著减少的心律失常。而且，用n‑3油甘油三酯乳剂再灌注的测试心脏显示了肌酸激酶水平下调以及某些有益的蛋白包括抗凋亡基因标记物Bcl‑2水平上调。

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年3月28日提交的，题为“用omega-3甘油酯再灌注促进对用于移植的供体器官的保护”的美国临时申请61/806,391的优先权，在此并入其全部内容。

政府利益声明

本发明是在美国国立卫生研究院拨款HL40404的政府支持下作出的。政府对本发明具有一定的权利。

背景技术

本发明提供了用于在等待移植时储存器官的保存液，保存液延长了所述器官的生命力并减少了对器官细胞的损伤。本发明还提供了在移植前或期间延长器官最大寿命的器官保存方法。

多年来，在理解细胞机制上已进行了大量的研究进展，并开发了新的移植技术，用于不仅在储存期间而且在再灌注这些器官后保存器官的生命力 (例如，最小化缺血/再灌注损伤)。因此，器官移植已成为既定的并有效的技术。限制临床应用器官移植的重要因素是从供体移除后器官的生存力下降。

通常，从供体移除后保存器官最常用的两种方法为简单的低体温储存和连续脉冲灌注。使用简单的低体温储存，器官从供体移除并迅速冷却。这通常通过冷却和短期灌注结合来实现，以使器官温度尽可能快降至0℃-4℃的温度，其中器官可保持至多约6小时。虽然冷藏能够使细胞移植，器官存活时期短。冷藏降低了速率，其中细胞内酶(器官生存所必需的必要细胞组分) 降解，但不完全地停止新陈代谢。

第二种已经历广泛研究的器官保存方法(即连续脉冲灌注)利用了以下要素：(1)脉动流，(2)低体温，(3)膜肺氧合(membrane oxygenation)以及 (4)包含白蛋白和脂质的灌注液。与简单的低体温相比时，尽管在技术上更复杂和昂贵，但连续脉冲灌注提供了明显更长的器官生存力。

在储存期间和用暖的再灌注液再灌注时，在0℃-4℃保存器官可能导致器官损伤。器官损伤发生经过损害上皮细胞、内皮细胞和实质细胞。尽管现有技术的一些溶液已用于延长供体器官的储存时间并减少再灌注时的器官损伤，但细胞损伤仍频繁发生。所希望的是延长器官的生存寿命并改善移植器官的质量。例如，使用现有技术的保存液并已冷藏超过48小时的肾脏，经常不能使用并必须丢弃。延长器官生存力以允许足够的时间来进行供体和受体的兼容性测试，并提高器官的可用性。还希望的是最小化再灌注时对器官的损害。保存在现有技术的溶液中的器官的缺血-再灌注损伤通常导致移植肾功能延迟恢复(delayed graft function)，并容易使该移植器官或组织发生急性和慢性排斥反应。

本领域仍然需要改善的方法和组合物来保存和制备用于移植的器官和组织。

发明内容

一些实施方式针对用于器官或组织体外灌注的omega-3水包油甘油酯乳剂，其中所述乳剂含有(a)适用于器官或组织保存和移植的灌注缓冲液，(b) 每100ml灌注缓冲液中按克计，少于7重量％(优选少于2重量％)的omega-3 油，其中所述omega-3油(i)含有以omega-3油总重量计的约10重量％至约99重量％的omega-3甘油二酯、omega-3甘油三酯及其组合，且所述 omega-3甘油二酯和omega-3甘油三酯的总酰基的至少约20％至约99％含有EPA或DHA，和(ii)含有以omega-3油总重量计的少于10重量％的omega-6 脂肪酸。所述乳剂自身具有(c)少于10％的omega-6油，且(d)乳剂中的脂质滴的平均直径为约100nm至小于约5微米，优选为100nm-500nm。