[发明专利]作为HSP27突变型(S135F)携带者的CMT病的动物模型

说明书

本发明涉及作为HSP27突变型(S135F)携带者的Charcot‑Marie‑Tooth病(CMT)的动物模型，具体而言，本发明涉及用于对CMT治疗剂候选物的效力进行评价的Charcot‑Marie‑Tooth病(CMT)动物模型，该动物模型通过如下方式获得：将表达突变型HSP27蛋白(其中，第135位的丝氨酸被置换为苯丙氨酸)的表达载体注射进小鼠的胚胎，并选择具有所述表达载体的小鼠，以检查所述小鼠是否展现出CMT的表型。

技术领域

本发明涉及HSP27突变(S135F)介导的Charcot-Marie-Tooth病的动物模型。

背景技术

对于开发新药和新的治疗方法来说，在以人为目标的研究中，使用动物模型的实验是不可避免的，并且必须在对人进行治疗之前完成。但是，考虑到人疾病的数量很大，而能够复制这样的人疾病的动物模型的数量非常小，这对新药和新的疾病治疗技术的开发而言是很大的障碍。可根据使用目的，构建具有不同特征和作用的多种动物模型。迄今已知的用于构建疾病动物模型的方法可分为三组。第一组方法是使用天然突变型形式作为动物疾病模型的方法；第二组方法是通过给予化学品或移植经操作的细胞系来诱导疾病的实验方法；以及，最新的方法是通过从分子遗传学途径快速发展出的基因移植进行的转染。对于开发新药和新治疗方法的研究，基于用于稳固动物模型的各种不同研究方法及它们的协作来建立有效的动物模型构建系统非常重要。

遗传性周围神经病变主要分为三类：遗传性运动感觉神经病变(HMSN)、遗传性运动神经病变(HMN)和遗传性感觉神经病变(HSN)。其中，大多数患者为遗传性运动感觉神经病变，其也被称为Charcot-Marie-Tooth病(CMT)。Charcot-Marie-Tooth病由法国科学家Charcot和Marie以及英国人Tooth于1886年首次鉴定。此后，该病以他们名字的首字母命名为CMT。Charcot-Marie-Tooth病是在运动神经元和感觉神经元中具有缺陷的所有遗传性疾病的总称，并且在罕见疾病中发病率最高(1/2500)。过去，该疾病被过于简单地理解为由远端下肢中的肌肉萎缩引起的疾病。由于肌肉萎缩，患有该病的患者具有倒立的香槟酒瓶状的腿。然而，该病现在被公认是综合征，而不是单一疾病。最近关于CMT的发病机制已经有新的发现，这不仅对病理生理学研究有很大帮助，而且对复杂的临床类型和基因型的分类有很大帮助。

在过去几年的研究中，已通过基因克隆技术鉴定出关于遗传性运动感觉神经病变的至少40个基因座，并且还已鉴定出至少20个致病基因。然而，经确认，许多遗传性运动感觉神经病变患者与上述所鉴定出的基因座并不相关，这表明存在至少50个以上HMSN致病基因。因此，对形成各种不同神经组织的成分均进行了鉴定。同样，预计可能存在多种类型的遗传性神经病变，因为存在多种遗传性肌肉营养不良(muscular dystrophies)。作为CMT1A(HMSN的最常见类型)的潜在的合理药物疗法，奥那司酮(onapriston)、抗坏血酸和NT-3(神经营养蛋白-3)在诊断和治疗方面引起了我们的关注。

热休克蛋白(HSP)作为分子伴侣和抗细胞凋亡蛋白众所周知，在大多数细胞中表达并在其中保存完好。根据氨基酸序列和分子量，热休克蛋白分为五组：100-110kDa家族、83-90kDa家族、66-78kDa家族、60kDa家族以及15-30kDa家族。HSP27属于小热休克蛋白家族，在哺乳动物组织(包括肌肉组织和神经组织)中表达。HSP27广泛分布于运动神经元和感觉神经元中。

HSP27是在细胞中以多种方式起作用的低分子量蛋白。该蛋白自身形成集落以自卫抵御外界环境刺激(例如自由基或毒素)。