[发明专利]免疫层析诊断试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及包含体外诊断药用样品垫的免疫层析诊断试剂盒，更详细而言，涉及侧流型的免疫层析诊断试剂盒。

背景技术

近年来，开发出了以短时间进行病毒或细菌等病原体感染的有无、妊娠的有无、肿瘤标记物的有无、食品中的特定原材料或残留农药等有害物质的有无等各种检查的简易检查试剂及诊断药、诊断试剂盒。它们利用了各检查对象物质以及与检查对象物质特异地反应的物质所引起的特异性反应。特别是，对于利用抗原与抗体的抗原抗体反应的免疫学测定法来说，开发出了免疫层析测定法、比浊免疫测定法、酶免疫测定法、化学发光测定法、放射免疫测定法、利用表面等离子体共振的测定法等许多测定法。并且，这些测定法被用于医院、诊疗所等中的疾病等的检查、食品公司等中的食物检查等中。其中，免疫层析测定法具有下述特点：不需要特别的设备、机器、知识，操作也简便，成本低，能够迅速诊断，因而正在实施非常多的检查。近年来，妊娠检查药、HIV检查药等由一般药店销售，普通消费者也能够进行测定，进而不仅能够进行对检查对象物质的有无进行检查的定性检查，还能够进行测定量的定量检查等。

作为免疫层析测定法的测定原理，有被称为夹心法的方法及被称为竞争法的方法。另外，作为测定形式，有被称为流过(Flow Through)型、侧流(Lateral Flow)型的方法。作为待检体中的检查对象物质，能够检测出各种各样的物质，作为典型的例子，有通过夹心法检测出抗原的测定，依次实施下述操作。

(1)将与作为检查对象物质的抗原特异性结合的抗体固定化于硝酸纤维素膜等层析介质的特定部位，在层析介质的任意位置形成被称为测试线(以下称为“TL”)的反应部位。

(2)制备检测试剂，对结合垫等涂布检测试剂并干燥，形成检测试剂含有部，与所述层析介质组合而形成免疫层析诊断试剂盒；所述检测试剂在酶、显色颗粒、荧光显色颗粒、磁性颗粒等标记物质上负载有与检查对象物质特异性结合的抗体。

(3)在所述免疫层析诊断试剂盒的特定位置例如样品垫上滴加包含抗原的待检体本身、或将待检体用任意液体稀释而成的溶液，从而使抗原和检测试剂在层析介质上展开。

通过这些操作，在反应部位，标记物质通过抗原被固定化于层析介质的抗体所捕捉，检测出标记物质的信号，从而利用免疫层析诊断试剂盒进行诊断。一般的诊断是仅检查抗原有无的定性诊断，但近年来通过用目视或机械检测出其信号的强度，从而也能够进行定量诊断。

对于免疫层析测定法来说，具有使诊断时间迅速化的需求。这是为了缩短检查的等待时间。作为用于达到该需求的一般性方法，有调节层析介质的孔径以加快待检体的转移速度的方法。

另外，以下的专利文献1中有下述报道：滴加包含检查对象物质的待检体试样的部分即样品垫使用特定的纤维素系纤维无纺布，从而能够使诊断时间迅速化。专利文献1中还涉及了吸液速度及展开性，但没有具体的诊断时间的数据，也完全没有提及与本发明这样的特定的显色颗粒的组合。此外也没有提及对样品垫与结合垫的配置进行研究。

另外，以下的专利文献2中有下述报道：通过对诊断试剂盒的结构等进行研究，能够使诊断时间迅速化，例如，在hCG分析中最短用2分钟35秒进行判定。

另外，作为免疫层析测定法的其它需求有分析灵敏度的提高。这意味着用更少的检查对象物质也能够检测出来。本发明人等在下述专利文献3中报道了以下内容：通过使用颜色深、粒径大的纤维素颗粒作为显色颗粒，能够提高分析灵敏度。但是，通过使用颜色深、粒径大的显色颗粒，虽然能够迅速诊断，但没有具体的诊断时间的数据，也完全没有提及与本发明这样的特定的样品垫的组合。

这样，通常来说诊断时间的迅速化和分析灵敏度的提高存在折衷的关系，为了兼顾两者，存在非常大的需求。

另外，在下述专利文献4中公开了使用免疫层析的半定量的试验方法，记载了在某个范围的抗原浓度下使抗原浓度与检查结果的信号强度成比例。但是，对于免疫层析中的定量来说，除了在某个范围的抗原浓度下抗原浓度与检查结果的信号强度成比例外，理想的是具有结果的再现性，即测定相同浓度的抗原时可得到相同强度的信号，但通常来说该再现性尚不充分。

此外，在下述专利文献5中公开了使用荧光颗粒作为显色颗粒的免疫层析诊断试剂盒，作为显色颗粒的原料，举出纤维素颗粒作为一例，作为样品垫的原料，举出纤维素无纺布作为一例，但均未进行任何具体的说明。此外也未对样品垫与结合垫的配置进行研究。当然，也未记载由本发明这样的样品垫与显色颗粒的组合所产生的效果。

现有技术文献

专利文献