[发明专利]诊断癌症的方法

说明书

本发明涉及诊断癌症疾病的方法，包括(a)测定癌症样品中CD95L的表达，和(b)根据CD95L表达的水平将癌症疾病分类。

另一方面是与CD95L特异性结合的试剂，以用于通过根据CD95L表达的水平将癌症疾病分类来诊断癌症疾病。

还有另一方面是预测癌症患者的总存活期和/或无复发存活期的方法，所述方法包括(a)测定癌症样品中CD95L的表达，和(b)根据CD95L表达的水平预测患者的存活期和/或无复发存活期，其中CD95L表达与存活期负相关。

本发明的另一方面是治疗癌症的方法，所述方法包括(a)测定从患者获得的癌症样品中CD95L的表达，和(b)如果在步骤(a)中在癌症样品中检测到CD95L的表达，施用CD95L抑制剂。

进一步的方面涉及CD95L用于治疗癌症疾病，其中癌症疾病是CD95L阳性的癌症疾病。

孤立肿瘤细胞对周围脑组织的侵袭是多形性胶质母细胞瘤(GBM)的有效治疗的主要障碍之一。神经胶质瘤包括大部分起源于中枢神经系统(CNS)的肿瘤。在成年人中，最常见的肿瘤是来源于星形胶质细胞或少突胶质细胞的高级别赘生物。世界卫生组织根据它们间变的程度将这些恶性肿瘤分为II期(弥漫性星形细胞瘤)、III期(间变性星形细胞瘤)和IV期(GBM)(Kleihues,P.,Burger,P.C.,&Scheithauer,B.W.The new WHO classification of brain tumors Brain Pathol.3,255-268,1993)。神经胶质瘤占所有脑肿瘤的超过50％，而且到目前为止是成年人中最常见的原发性脑肿瘤。尽管开发了新的诊断技术，存活率还是非常低。只有3％在诊断后五年仍然存活。恶性胶质瘤的临床结果依赖于孤立肿瘤细胞在正常脑组织中的侵袭。迁移细胞可以避开肿瘤的手术切除，并且是随后的放疗和辅助性化疗的主要目标。化疗剂和放射主要通过诱导凋亡发挥作用。这种对凋亡的诱导通常涉及CD95(Apo-1/Fas)死亡受体/配体系统的激活。尽管如此，大部分恶性胶质瘤细胞对于CD95诱导的凋亡有抵抗力。

在癌症诊断中，CD95L还没有被视为是预后因素。在癌症治疗中，CD95L的表达还没有被认为与治疗策略的确定相关。

在本发明中，令人惊讶地发现，癌症样品中CD95L的表达与降低的患者存活率有关。这意味着CD95L的表达是癌症患者总存活期的预后因素。实施例1证明在临床II期研究中，在诊断为“胶质母细胞瘤”的肿瘤样品中，CD95L以不同程度被表达。

而且，实施例1令人惊讶地证明CD95L抑制剂，例如APG101，可以在患者中提高癌症存活率，所述患者患有表达CD95L的癌症。相反，患有不表达CD95L的癌症的患者不能从CD95L抑制剂的治疗受益。实施例1使得这样的治疗策略成为可能，所述治疗策略包括诊断步骤，所述诊断步骤包括测定癌症样品中的CD95L表达，如果表达CD95L，随后用CD95L抑制剂治疗患者。通过CD95L的表达对癌症进行诊断性区分是可行的。这导致在CD95L表达的程度上对癌症(例如胶质母细胞瘤)有新的诊断分类，由此导致对于那些患有表达CD95L的癌症的患者进行适应性治疗。该策略是有利的，因为仅仅给那些预期能够成功治疗的患者施用CD95L抑制剂。这对于那些患有不表达CD95L的癌症的患者没有不利影响，因为这些患者可能不会从CD95L抑制剂的治疗中受益。

因此，可以看出，本发明的问题是癌症诊断和治疗的改进。本文提供的解决方案包括对癌症进行诊断性区分，区分为表达CD95L的亚型，和不表达CD95L的亚型。这些亚型至今尚未被鉴别，也未被认为需要基于CD95L表达进行特异性治疗。本发明提供的解决方案包括根据本发明鉴别的亚型的诊断进行的特异性治疗。

本发明的第一方面是用于诊断癌症疾病的方法，包括

(a)测定癌症样品中CD95L的表达，和

(b)根据CD95L表达水平将癌症疾病分类。

在本发明的优选实施方案中，用于诊断癌症疾病的方法可以包括步骤(c)，即确定和/或选择适合于已进行过诊断的这种类型的癌症的治疗方法，和/或进行治疗。

在本发明中，可以通过任何已知的适合的方法测定CD95L的表达。例如，可以测定CD95L mRNA。适合的方法的优选实例是组织学、组织化学和/或免疫组化方法。

本文所述的癌症诊断中使用的样品可以是存档的肿瘤组织，例如包埋在石蜡中的组织活检或手术材料，其是在疾病早期获得的。