[发明专利]用于神经细胞培养的培养基组合物有效

专利信息
申请号: 201480034512.8 申请日: 2014-04-17
公开(公告)号: CN105431525B 公开(公告)日: 2020-04-10
发明(设计)人: F·H·盖奇;C·巴尔迪 申请(专利权)人: 索尔克生物学研究所
主分类号: C12N5/079 分类号: C12N5/079;C12N5/0793;C12N5/0797
代理公司: 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 代理人: 龙淳;周琴
地址: 美国加利*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 用于 神经 细胞培养 培养基 组合
【权利要求书】:

1.一种细胞培养基,包含:

(a)氯化钠,浓度为约70mM~约150mM;

(b)神经活性无机盐,浓度为约0.000001mM~约10mM;

(c)甘氨酸,浓度为约0.0001mM~约0.05mM;

(d)L-丙氨酸,浓度为约0.0001mM~约0.05mM;和

(e)L-丝氨酸,浓度为约0.001mM~约0.03mM。

2.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中,所述神经活性无机盐选自氯化钾、氯化钙、硫酸镁、氯化镁、硝酸铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸铁及其组合。

3.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含浓度为约0.00001mM~约0.003mM的L-天冬氨酸。

4.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含浓度为约0.00001mM~约0.02mM的L-谷氨酸。

5.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含PH调节剂,其中所述调节剂为无机盐。

6.根据权利要求5所述的细胞培养基,其中,所述无机盐浓度为约0.001mM~约1mM,且其中所述无机盐选自磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、及其组合。

7.根据权利要求5所述的细胞培养基,其中,所述无机盐浓度为约1mM~约35mM,且其中所述无机盐为碳酸氢钠。

8.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含一种或多种氨基酸,其中各氨基酸的浓度为约0.001mM~约1mM。

9.根据权利要求8所述的细胞培养基,其中所述一种或多种氨基酸选自L-丙氨酰-L-谷氨酰胺、L-精氨酸盐酸盐、L-天冬酰胺-H2O、L-半胱氨酸盐酸盐-H2O、L-胱氨酸2HCl、L-组氨酸盐酸盐-H2O、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸盐酸盐、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-酪氨酸二钠盐二水合物、L-缬氨酸及其组合。

10.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含一种或多种维生素,其中各维生素以约0.00001mM~约1mM的浓度存在。

11.根据权利要求10所述的细胞培养基,其中所述一种或多种维生素选自氯化胆碱、D-泛酸钙(B5)、叶酸(B9)、i-肌醇、烟酰胺(B3)、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、维生素B12(氰钴胺素)、核黄素(B2)及其组合。

12.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含选自蛋白质、神经营养因子、类固醇、激素、脂肪酸、脂质、维生素、硫酸盐矿物、有机化合物、单糖、核苷、及其组合的补充剂。

13.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含浓度为约0.1mM~约5mM的能量基质。

14.根据权利要求13所述的细胞培养基,其中所述能量基质选自糖、丙酮酸钠及其组合。

15.根据权利要求1所述的细胞培养基,还包含光敏剂。

16.根据权利要求15所述的细胞培养基,其中所述光敏剂是浓度为约0.0001mM~约0.0006mM的核黄素(B2)。

17.根据权利要求15所述的细胞培养基,其中所述光敏剂是浓度为约1mM~约10mM的HEPES。

18.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中所述细胞培养基不包含血清。

19.根据权利要求1所述的细胞培养基,其中所述培养基的摩尔渗透压浓度为约280Osm/L~约330Osm/L。

20.一种培养神经元细胞的方法,包括使神经元细胞与权利要求1~19中任一项所述的培养基接触。

21.根据权利要求20所述的方法,其中所述神经元细胞为原代神经元细胞。

22.根据权利要求20所述的方法,其中,所述神经元细胞为iPSC来源的神经元细胞。

23.一种哺乳动物细胞,其在权利要求1~19中任一项所述的培养基中培养。

24.根据权利要求23所述的哺乳动物细胞,其中所述哺乳动物细胞为神经元细胞。

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