[发明专利]特异性结合分子的合成文库

权利要求书

1.一种使用含有编码多个抗原特异性抗原结合分子的可表达DNA序列的文库的转化宿主生产抗原特异性抗原结合分子的方法，其中，该文库从至少两种异源同种型NAR序列创建，其中，所述抗原特异性抗原结合分子含有多个在板鳃亚纲物种成员中发现的免疫球蛋白同种型NAR的可变区的结构域；

其中，所述抗原特异性抗原结合分子具有如下式（I）所示的肽结构域结构：

FW1-CDR1-FW2-HV2-FW3a-HV4-FW3b-CDR3-FW4

并且其中，可表达的DNA序列的文库由包括以下步骤的方法生产：

（1）从板鳃亚纲的物种成员中分离RNA；

（2）从步骤（1）获得的编码抗原特异性抗原结合分子的RNA扩增DNA序列，以创建编码抗原特异性结合分子的DNA序列数据库；

（3）从步骤（2）制备的数据库中选择DNA序列；

（4）在多个与步骤（3）选择的序列中的CDR1或CDR3互补的异源低聚物存在的情况下，扩增编码FW1-CDR1-FW2-HV2-FW3a-HV4-FW3b-CDR3-FW4的两个或多个连续的肽结构域的DNA序列，以形成多个编码式（I）的抗原特异性抗原结合分子的扩增的DNA序列，其中，所述两个或多个连续的肽结构域当被连接时编码式（I）的抗原特异性抗原结合分子，并且其中所述两个或多个连续的肽结构域来自于在步骤（3）中选择的至少两个异源DNA序列；

（5）将编码两个或多个连续的肽结构域的所述扩增的DNA序列连接在一起以形成编码具有式（I）的肽结构域结构的抗原特异性结合分子的DNA序列；

（6）将步骤（3）获得的扩增的DNA克隆入展示载体；以及

（7）使用所述展示载体转化宿主以产生所述抗原特异性抗原结合分子的文库。

2.一种抗原特异性抗原结合分子的生产方法，该方法包括：

（1）从根据权利要求1中所述的方法制备的文库中选择预期克隆；

（2）从这些克隆中分离并纯化抗原特异性抗原结合分子；

（3）将编码抗原特异性抗原结合分子的DNA序列克隆入表达载体中；以及

（4）转化宿主以允许表达载体的表达。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述两个或多个连续的肽结构域为FW1、CDR1-FW2-HV2-FW3a-HV4-FW3b和CDR3-FW4。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述RNA分离自板鳃亚纲物种的多个不同成员。