[发明专利]用于治疗硬皮病的抗CCL2和抗LOXL2组合疗法

说明书

本发明尤其提供了结合CCL2和LOXL2两者的双特异性分子，包括但不限于抗体、fynomer、适配体、融合蛋白和蛋白结合结构域；及其用途，具体来说，用于治疗硬皮病和相关纤维化和/或炎性疾病、病症和病状的用途。在一些实施方案中，本发明还提供了基于单特异性抗CCL2和抗LOXL2分子的组合的用于治疗硬皮病和相关纤维化和/或炎性疾病、病症和病状的方法和组合物。

相关申请的交叉引用

本申请根据美国法典第35篇第119条(e)款要求2013年5月23 日提交的美国临时专利申请序列号61/826,692的权益，该申请特此通过引用整体并入。

序列表

本说明书引用了2014年5月23日作为命名为“2006685-0569_ST25”的ASCII.txt文件以电子表格提交的序列表。该.txt文件在2014年5月12日生成并且大小为7KB。

发明背景

系统性硬化(硬皮病)是结缔组织的临床异质性病症，导致皮肤变硬和变紧。系统性硬化是特征在于免疫活化、血管损伤和纤维化的自身免疫型疾病。累及肺部、心脏、肾脏和胃肠道的主要基于器官的并发症可促成死亡率和发病率。发病机理未知。

最常与硬皮病相关的特征是纤维化—皮肤和器官中的胶原蛋白积累。胶原蛋白积累促成病症的症状，包括脱发、皮肤变硬和变紧、皮肤色素减退、关节疼痛、手指和关节僵硬、消化道问题和呼吸并发症(干咳、呼吸短促、喘息)。硬皮病可分为两个主要亚类：局限型皮肤硬皮病和弥漫型皮肤硬皮病。在局限型皮肤硬皮病中，纤维化主要限于手、臂和面部。弥漫型皮肤硬皮病是影响大面积皮肤并且危及一个或多个内部器官的急进性病症。有局限型皮肤硬皮病的患者具有比有弥漫型皮肤硬皮病的患者相对更好的长期预后。分布广泛的全身性硬皮病可损伤心脏、肾脏、肺部或胃肠道，这可导致死亡。在有硬皮病的患者中肺纤维化是最常见的死因。

因此，硬皮病是具有潜在致命影响的极端致衰弱性疾病。在美国存在约50,000名患者。女性患者与男性患者的比率为约4:1。当前的治疗方法仅仅基于对症治疗和对病程中出现的并发症的管理(例如，皮质类固醇、NSAID和免疫抑制药，如氨甲蝶呤(Metotrexate)和环磷酰胺(Cytoxan))。没有治疗显示逆转或中断疾病的进展。因此，存在高度未满足的对硬皮病有效治疗的医疗需要。

发明概述

本发明提供了(除了其它以外)尤其基于可与赖氨酰氧化酶样 -2(“LOXL2”)和C-C趋化因子配体-2(“CCL2”)特异性结合的双特异性结合分子，包括但不限于抗体、fynomer、适配体、融合蛋白、蛋白结合结构域(例如，源自受体的蛋白结合结构域)，用于有效治疗硬皮病的改进的方法和组合物，和/或基于与LOXL2和CCL2特异性结合的此类分子的组合疗法。已知CCL2是硬皮病的验证靶标。几项研究已经表明硬皮病成纤维细胞展示出CCL2mRNA和蛋白质的组成型表达增加。在硬皮病皮肤切片中，在成纤维细胞、角化细胞和单核细胞中检测到CCL2表达，而在正常皮肤中未能检测到(Galindo等， Arthritis Rheum.2001年6月；44(6):1382-6；Distler等，Arthritis Rheum. 2001年11月；44(11):2665-78；Lioyd等，ExpMed.1997年4月7日； 185(7):1371-80；Yamamoto等，J Dermatol Sci.2001年6月； 26(2):133-9；Denton等，Trends Immunol.2005年11月；26(11):596-602. 2005年9月15日电子出版物)。然而，在本发明之前，尚未基于抗 CCL2抗体开发出对于硬皮病的有效治疗。本发明人观察到血浆中高水平的CCL2隔绝静脉注射的抗CCL2抗体，导致抗CCL2抗体浪费并且对患病组织中CCL2的靶向无效。为解决这个问题，本发明人考虑到使用允许以与组织CCL2结合的自由抗CCL2臂将抗CCL2活性隔绝在患病组织中，这样提供对CCL2的组织特异性靶向的双特异性分子。因此，本发明提供了优先抑制与血浆CCL2相对的组织CCL2 的方法和组合物，导致对硬皮病的高效治疗。