[发明专利]作为鉴别潜在味觉调节剂的模型的细胞在审
申请号: | 201480036880.6 | 申请日: | 2014-05-09 |
公开(公告)号: | CN105339384A | 公开(公告)日: | 2016-02-17 |
发明(设计)人: | Y·库拉施;S·格雷维纳 | 申请(专利权)人: | 百事可乐公司 |
主分类号: | C07K14/075 | 分类号: | C07K14/075 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 李瑛 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 作为 鉴别 潜在 味觉 调节剂 模型 细胞 | ||
1.鉴别甜味调节剂的方法,包括:
a)使U2-OS细胞与测试化合物接触;和
b)测量甜味感受器活性,其中甜味感受器活性因测试化合物的变化表明甜味感受器受到测试化合物的调节,由此将测试化合物鉴别为甜味调节剂。
2.权利要求1的方法,其中U2-OS细胞被修饰以超表达甜味感受器。
3.权利要求1的方法,其中通过检测U2-OS细胞中胞内第二信使的水平来测量甜味感受器活性。
4.权利要求3的方法,其中第二信使是cAMP、cGMP、NO、CO或H2S。
5.权利要求3的方法,其中第二信使是DAG或IP3。
6.权利要求1的方法,其中通过检测细胞中的胞内钙的水平来测量甜味感受器活性。
7.权利要求1的方法,其中所述甜味感受器活性是结合活性。
8.权利要求7的方法,其中通过竞争性结合试验来检测结合活性的变化。
9.权利要求7的方法,其中通过表面等离波子共振来检测结合活性的变化。
10.权利要求1的方法,其中通过检测ERK1/2的磷酸化来测量甜味感受器活性。
11.权利要求1的方法,其中通过检测感受器的内化来测量甜味感受器活性。
12.权利要求1-11任一项的方法,其中U2-OS细胞进一步包括编码Gα15、Gα16、Gα16gust25、Gα15gust25、Gα16gust44、Gα15gust44或Gα15-i/3-5的外源性核酸。
13.权利要求1-12任一项的方法,其中U2-OS细胞包括Tet-阻遏蛋白表达构建体。
14.分离的U2-OS细胞,包括编码Gα15、Gα16、Gα16gust25、Gα15gust25、Gα16gust44、Gα15gust44或Gα15-i/3-5的外源性核酸。
15.分离的U2-OS细胞,包括一个或多个编码甜味感受器的外源性核酸。
16.分离的U2-OS细胞,包括编码检测标记的外源性核酸。
17.权利要求16的分离的U2-OS细胞,其中所述检测标记是β-拘留蛋白GFP。
18.权利要求14或15的分离的U2-OS细胞,进一步包括编码检测标记的外源性核酸。
19.权利要求14-16任一项的分离的U2-OS细胞,进一步包括编码Gα15、Gα16、Gα16gust25、Gα15gust25、Gα16gust44、Gα15gust44或Gα15-i/3-5的外源性核酸。
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