[发明专利]鉴定、分离并使用气味和芳香受体的方法在审
申请号: | 201480036935.3 | 申请日: | 2014-06-28 |
公开(公告)号: | CN105339509A | 公开(公告)日: | 2016-02-17 |
发明(设计)人: | P·普菲斯特;M·E·罗杰斯;K·J·帕里斯 | 申请(专利权)人: | 弗门尼舍有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C07K14/705;G01N33/50;G01N33/566 |
代理公司: | 北京三幸商标专利事务所(普通合伙) 11216 | 代理人: | 刘淼 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鉴定 分离 使用 气味 芳香 受体 方法 | ||
1.一种鉴定被气味和/或芳香化合物激活的嗅觉受体的方法,包括:
a)从非人类哺乳动物物种中将含有天然嗅觉神经元的分离的嗅觉上皮解离成单个细胞,其中每个神经元都表达嗅觉受体;
b)给嗅觉细胞加载指示剂染料,该染料允许测定嗅觉受体的恶臭受体结合活性;
c)使嗅觉受体与恶臭化合物接触;
d)测定由气味诱导的神经元活性的变化;
e)将被恶臭化合物激活的一个或多个嗅觉神经元分离;
f)扩增所分离的嗅觉受体的mRNA;
g)通过下一代测序技术对该mRNA的全部转录组的至少一部分进行测序;并且
h)通过将该转录组的序列与同一物种的参考基因组序列进行比较,从而确定一组恶臭嗅觉受体的同一性。
2.权利要求1所述的方法,还包括鉴定与权利要求1中鉴定出的恶臭嗅觉受体最相关的人类受体。
3.权利要求1所述的方法,还包括修饰细胞系以表达至少一种权利要求1中鉴定出的恶臭嗅觉受体。
4.权利要求2所述的方法,还包括修饰细胞系以表达至少一种权利要求2中鉴定出的人类受体。
5.权利要求3所述的方法,还包括将该恶臭嗅觉受体与试验化合物相接触,以确定该试验化合物是否结合至该恶臭嗅觉受体。
6.权利要求4所述的方法,还包括将该人类受体与试验化合物相接触,以确定该试验化合物是否结合至该受体。
7.一种分离的核酸,其与从由如下序列构成的群组中选出的核酸序列具有至少60%的序列同一性:SEQIDNO:1、SEQIDNO:3、SEQIDNO:5、SEQIDNO:7、SEQIDNO:9、SEQIDNO:11、SEQIDNO:13、SEQIDNO:15、SEQIDNO:27、SEQIDNO:29、SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:35、SEQIDNO:37、SEQIDNO:39、SEQIDNO:41、SEQIDNO:43、SEQIDNO:45、SEQIDNO:47、SEQIDNO:49、SEQIDNO:51、SEQIDNO:53、SEQIDNO:55、SEQIDNO:57、SEQIDNO:59、SEQIDNO:61、SEQIDNO:63、SEQIDNO:65、SEQIDNO:67、SEQIDNO:69、SEQIDNO:71、SEQIDNO:73、SEQIDNO:75、SEQIDNO77、SEQIDNO79、SEQIDNO81、SEQIDNO83和SEQIDNO85。
8.一种分离的核酸,其与从由如下序列构成的群组中选出的核酸序列具有至少65%的序列同一性:SEQIDNO:1、SEQIDNO:3、SEQIDNO:5、SEQIDNO:7、SEQIDNO:9、SEQIDNO:11、SEQIDNO:13、SEQIDNO:15、SEQIDNO:27、SEQIDNO:29、SEQIDNO:31、SEQIDNO:33、SEQIDNO:35、SEQIDNO:37、SEQIDNO:39、SEQIDNO:41、SEQIDNO:43、SEQIDNO:45、SEQIDNO:47、SEQIDNO:49、SEQIDNO:51、SEQIDNO:53、SEQIDNO:55、SEQIDNO:57、SEQIDNO:59、SEQIDNO:61、SEQIDNO:63、SEQIDNO:65、SEQIDNO:67、SEQIDNO:69、SEQIDNO:71、SEQIDNO:73、SEQIDNO:75、SEQIDNO77、SEQIDNO79、SEQIDNO81、SEQIDNO83和SEQIDNO85。
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