[发明专利]遗传不育动物

权利要求书

1.经遗传修饰的家畜动物，所述动物包括遗传修饰以破坏选择性参与 配子发生的靶基因，其中对所述靶基因的破坏阻止所述动物中功能性配子的 形成。

2.权利要求1的家畜动物，其中对所述靶基因的破坏在可诱导系统的 控制下。

3.权利要求1的动物，其中所述靶基因选自下组：DAZL，vasa，CatSper， KCNU1，DNAH8，和睾丸表达基因11(Tex11)。

4.权利要求1-3任一项的动物，其中所述靶基因在X染色体，Y染色 体，或常染色体上。

5.权利要求1的动物，其中对所述靶基因的破坏选择性抑制雄性配子 或雌性配子的形成。

6.权利要求1的动物，其中所述靶基因选自下组：TENR，ADAM1a， ADAM2，ADAM，alpha4，ATP2B4基因，Catsper基因亚单位，CatSperl， CatSper2，CatSper3，Catsper4，CatSperbeta，CatSpergamma，CatSperdelta， Clamegin，Complexin-I，塞尔托利氏细胞(Sertolicell)雄激素受体，Gasz， Ral75，Cib1，Cnot7，Zmynd15，CKs2，和Smcp。

7.权利要求1的动物，其中所述靶基因对于精子发生是必要的，其中 对所述基因的破坏选择性抑制精子发生。

8.权利要求7的动物，其中所述靶基因包括睾丸表达基因11(Tex11)。

9.权利要求1的动物，其中所述靶基因对于精子运动性，精子顶体融 合，或精子融合生殖(syngamy)是必要的，其中对所述靶基因的破坏选择 性抑制精子运动性，精子顶体融合，或精子融合生殖的一项或多项。

10.权利要求9的动物，其中对所述靶基因的破坏选择性抑制精子运动 性，且所述基因选自下组：TENR，ADAM1a，ADAM3，Atpla4，和ATP2B4。

11.权利要求9的动物，其中对所述靶基因的破坏选择性抑制精子顶体 融合，且所述基因选自下组：ADAM2，ADAM3，Catsper，Clamegin，和 Complexin-I。

12.权利要求1-11任一项的动物，其中所述动物选自下组：非人脊椎动 物，非人灵长类动物，牛，马，猪，绵羊，鸡，鸟类，兔，山羊，犬，猫， 和鱼。

13.权利要求1的动物，其不能产生功能性精子。

14.权利要求13的动物，其中所述靶基因包括DAZL。

15.权利要求1的动物，其为供体细胞的接受体，所述供体细胞产生具 有供体的单倍体供体染色体补充(complement)的功能性供体精子。

16.制备动物细胞的方法，包括

向选自下组的生物体导入试剂：非人细胞和非人胚胎，所述试剂特异性 结合细胞的染色体靶位点以破坏基因从而选择性破坏配子发生，其中所述试 剂选自下组：靶向性核酸内切酶，RNA引导核酸酶，重组酶融合蛋白。

17.权利要求16的方法，其中所述试剂是靶向性核酸内切酶，并包括 TALEN或TALEN对，其包含特异性结合染色体靶位点的序列。

18.权利要求16或17的方法，进一步包括向所述生物体中引入核酸， 其中所述核酸序列在所述染色体靶位点引入所述生物体的基因组。

19.权利要求16或17的方法，其中所述细胞选自下组：体外细胞，体 外原代细胞，合子，卵母细胞，配子发生细胞，精子细胞，卵母细胞，干细 胞，和合子。

20.权利要求16或17的方法，进一步包括向所述细胞中引入核酸模板， 其中所述模板具有与通过断裂产生的末端基本同源的末端，其中所述核酸模 板序列在所述染色体靶位点引入所述生物体的基因组。