[发明专利]利用表达昆虫天冬氨酸1-脱羧酶的重组酵母的3-羟基丙酸生产

权利要求书

1.一种重组酵母细胞，该重组酵母细胞包含对以下纲的天冬氨酸1-脱羧酶进行编码的异源多核苷酸：昆虫纲、双壳纲、鳃足纲、腹足纲、或头索纲，其中该细胞能够产生3-羟基丙酸(3-HP)。

2.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该昆虫纲的天冬氨酸1-脱羧酶是选自下组的目的昆虫天冬氨酸1-脱羧酶，该组由以下各项组成：蜚蠊目、鞘翅目、革翅目、双翅目、纺足目、蜉蝣目、半翅目、膜翅目、鳞翅目、螳螂目、长翅目、广翅目、石蛃目、脉翅目、蛩蠊目、蜻蜓目、直翅目、竹节虫目、襀翅目、啮虫目、蛇蛉目、蚤目、捻翅目、缨翅目、毛翅目、缺翅目、和衣鱼目。

3.如权利要求1或2中的任一项所述的重组酵母细胞，其中该昆虫纲的天冬氨酸1-脱羧酶与SEQIDNO:162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、或191的氨基酸序列具有至少60％，例如至少65％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。

4.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该鳃足纲的天冬氨酸1-脱羧酶与SEQIDNO:192的氨基酸序列具有至少60％，例如，至少65％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。

5.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该腹足纲的天冬氨酸1-脱羧酶与SEQIDNO:193的氨基酸序列具有至少60％，例如，至少65％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。

6.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该头索纲的天冬氨酸1-脱羧酶与SEQIDNO:194的氨基酸序列具有至少60％，例如，至少65％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。

7.如权利要求1所述的重组酵母细胞，其中该双壳纲的天冬氨酸1-脱羧酶与SEQIDNO:195的氨基酸序列具有至少60％，例如，至少65％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％的序列一致性。

8.如权利要求1-7中的任一项所述的重组酵母细胞，其中该天冬氨酸1-脱羧酶在与SEQIDNO:162的氨基酸序列的位置377对应的残基处包含谷氨酰胺。

9.如权利要求8所述的重组酵母细胞，其中该天冬氨酸1-脱羧酶在与SEQIDNO:162的氨基酸序列的位置377对应的位置处包含谷氨酰胺，并且包含与SEQIDNO:162的氨基酸382-516具有至少75％，例如，至少80％、至少85％、90％、95％、97％、98％、99％、或100％序列一致性的部分氨基酸序列。

10.如权利要求1-9中的任一项所述的重组酵母细胞，其中该天冬氨酸1-脱羧酶包含F₁aa₁₉S₂aaY₃基序或Y₁aa₁₉S₂aaY₃基序，其中F₁是苯丙氨酸，Y₁是酪氨酸，aa₁₉是具有十九个氨基酸的插入序列，S₂是丝氨酸，aa是单个氨基酸，并且Y₃是酪氨酸。

11.如权利要求1-10中的任一项所述的重组酵母细胞，其中编码天冬氨酸1-脱羧酶的该异源多核苷酸包含对于编码天冬氨酸1-脱羧酶的多核苷酸而言外源的启动子。