[发明专利]免疫色谱法中使用光反射材料的检测光的增强方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于特异性且迅速地检测样品中的被检测物质的方法和使用该方法的试剂盒。

背景技术

免疫色谱法是利用如下原理，通过目视或检测装置检测有无不溶性载体颗粒的聚集，从而分析有无被检测物质的免疫学方法：使用结合有特异性地识别被检测物质的配体的不溶性载体颗粒，该载体颗粒捕捉被检测物质，利用毛细管现象在具有纤维结构的试验片中移动，与在试验片中的规定位置固定的特异性地结合被检测物质的捕捉物质结合，由此凝集的不溶性载体颗粒在试验片中的规定位置聚集。由于它的简便性，被广泛用作非实验室用的POCT (即时检验(Point Of Care Test))的体外诊断用药品。

以往，作为标记特异性地识别被检测物质的配体的对象的颗粒，使用金胶体、铂金胶体、着色聚苯乙烯颗粒等不溶性载体颗粒，利用各种颗粒的色调，使用目视或专用的装置判断有无颗粒的聚集。

以进一步高灵敏度化作为课题，有人提出了使用发射荧光的微粒发挥免疫凝集反应的简便性以提高灵敏度(参照专利文献1)。

另外，在使用发射荧光的微粒的情况下，为了其高灵敏度检测而需要专用的装置。其便携性在考虑作为POCT利用的情况下是非常重要的课题。

为了解决该课题，还有人提出了极具便携性、廉价且耐用的灵敏度高的荧光检测用装置(参照专利文献2)。

虽然提出了使用这种发射荧光的颗粒或装置用于免疫色谱法的高灵敏度检测方法，但在检测在试验片上的规定位置聚集的发射荧光的颗粒受到光照射被激发而从上述颗粒产生的光的试验系统中，尚未有人提出可通过改良其试验片和储存试验片的盒子(而非颗粒)进行高灵敏度检测的技术。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2012-32263号公报

专利文献2：日本特表2005-515429号公报。

发明内容

发明所要解决的课题

在使用专用的检测装置高灵敏度化时，检测装置侧的检测结构多数不得不复杂化，另一方面使用含有被检测物质的来源于生物体的物质进行了试验的试验片(POCT试剂盒本体)在使用后必须废弃。为了在临床现场广泛普及并可在各领域应用，希望试验片的处理简便且廉价。因此，试验片的结构必须简单。

本发明的目的在于提供一种免疫色谱试验片，其可使被检测物质的高灵敏度检测与简单的试验片结构这样的通常难以相容的项目并存。

解决课题的手段

在使用荧光检测装置等检测装置的测定中，从检测装置所含有的光源向试验片照射一定波长的激发光。试验片上聚集的发射荧光的颗粒接受该激发光，发出特定波长的荧光。通过检测装置检测从该发射荧光的颗粒发出的特定波长的光。

虽然从检测装置照射的激发光照射试验片上的发射荧光的颗粒聚集的部位，但此时并不是所有的激发光照射到颗粒，多数的光会穿越至试验片下部，无助于荧光的产生而会降低光强度。

本发明的试验片通过在试验片下部设置反射照射光的光反射材料来反射会穿越至该试验片下部的照射光，有效地将照射光照射到聚集的发射荧光的颗粒，从而增强产生的荧光、即最终检测的光。本发明的试验片与以往的试验片相比无大的变化，其不具有复杂的结构而具有简单的结构，但是，通过设置反射材料，使得可高灵敏度地检测被检测物质。

另外，在使用着色成可见光区域的颜色的颗粒而不是发射荧光的颗粒的情况下，通过在试验片下部设置反射照射光的光反射材料，在颗粒聚集的部位照射的光的反射光因颗粒的存在而衰减，另一方面，在颗粒聚集的部位以外的周围的部位反射后被检测的光的强度增强，最终检测的光增强，使得可高灵敏度地检测被检测物质。

即，本发明如下所述。

[1] 免疫色谱试验片，其含有固定有作为与被检测物质结合的配体的捕捉物质的膜，使用结合有与被检测物质结合的配体的不溶性载体颗粒，通过将该不溶性载体颗粒捕捉至固定于膜上的捕捉物质而使其聚集，将光照射至膜，检测在该不溶性载体颗粒聚集的部位或不溶性载体颗粒聚集的部位以外的周围的部位发出的光，由此测定被检测物质，其中，在膜的照射光的一侧的相反侧设置光反射材料。

[2] [1]的免疫色谱试验片，其中，不溶性载体颗粒为进行了荧光标记的不溶性载体颗粒，照射激发光作为照射光，通过检测从不溶性载体颗粒聚集的部位发出的荧光来测定被检测物质。