[发明专利]用于表征人膜蛋白的功能和相互作用的病毒体展示阵列有效
申请号: | 201480046413.1 | 申请日: | 2014-06-20 |
公开(公告)号: | CN105473745B | 公开(公告)日: | 2019-12-03 |
发明(设计)人: | 朱衡;普拉施安特·德赛;利民;胡少晖 | 申请(专利权)人: | 约翰霍普金斯大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12M1/34 |
代理公司: | 11262 北京安信方达知识产权代理有限公司 | 代理人: | 郑霞<国际申请>=PCT/US2014/ |
地址: | 美国马*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 表征 膜蛋白 功能 相互作用 病毒 展示 阵列 | ||
1.一种阵列,所述阵列包含:
(a)基材;以及
(b)与所述基材的表面缔合的多个重组疱疹病毒病毒体微点,其中所述重组疱疹病毒病毒体微点包含多个重组疱疹病毒病毒体,其中所述重组疱疹病毒病毒体包含包膜,所述包膜包含保留它们的天然构象、相互作用或两者的多种人异源膜结合蛋白,并且其中所述人异源膜结合蛋白由所述重组疱疹病毒病毒体的基因组编码并在gB或gC启动子的控制下表达。
2.如权利要求1所述的阵列,其中所述重组疱疹病毒病毒体包括重组单纯疱疹病毒病毒体。
3.如权利要求2所述的阵列,其中所述重组单纯疱疹病毒病毒体包括单纯疱疹病毒1型病毒体。
4.如权利要求1所述的阵列,其中所述人异源膜结合蛋白包括具有单个跨膜结构域的典型的I型膜蛋白。
5.如权利要求4所述的阵列,其中所述具有单个跨膜结构域的典型的I型膜蛋白包括CD4。
6.如权利要求1所述的阵列,其中所述人异源膜结合蛋白包括多次跨越的G蛋白偶联受体膜蛋白。
7.如权利要求6所述的阵列,其中所述多次跨越的G蛋白偶联受体包括GPR77。
8.如权利要求1所述的阵列,其中所述人异源膜结合蛋白选自由以下组成的组:离子通道、受体酪氨酸激酶、受体丝氨酸/苏氨酸激酶、受体鸟苷酸环化酶、生长因子受体、激素受体及其组合。
9.如权利要求1-8中任一项所述的阵列,其中与所述基材的表面缔合的多个重组病毒体微点的密度的范围为从1个/cm2至50个/cm2。
10.一种用于制备包含基材的阵列的方法,所述方法包括:
(a)使包含重组疱疹病毒病毒体的溶液与所述基材的表面接触,其中所述重组疱疹病毒病毒体包含包膜,所述包膜包含多种人异源膜结合蛋白,其中所述多种人异源膜结合蛋白保留它们的天然构象、相互作用或两者,并且其中所述人异源膜结合蛋白由所述重组疱疹病毒病毒体的基因组编码并在gB或gC启动子的控制下表达;以及
(b)重复所述接触,以提供在所述基材的表面上的重组疱疹病毒病毒体微点模式。
11.如权利要求10所述的方法,其中所述重组疱疹病毒病毒体包括重组单纯疱疹病毒病毒体。
12.如权利要求11所述的方法,其中所述重组单纯疱疹病毒病毒体包括单纯疱疹病毒1型病毒体。
13.如权利要求10所述的方法,其中所述人异源膜结合蛋白包括具有单个跨膜结构域的典型的I型膜蛋白。
14.如权利要求13所述的方法,其中所述具有单个跨膜结构域的典型的I型膜蛋白包括CD4。
15.如权利要求10所述的方法,其中所述人异源膜结合蛋白包括多次跨越的G蛋白偶联受体膜蛋白。
16.如权利要求15所述的方法,其中所述多次跨越的G蛋白偶联受体包括GPR77。
17.如权利要求10所述的方法,其中所述人异源膜结合蛋白的至少一种或每种选自由以下组成的组:离子通道、受体酪氨酸激酶、受体丝氨酸/苏氨酸激酶、受体鸟苷酸环化酶、生长因子受体、激素受体及其组合。
18.一种用于检测异源膜结合蛋白和靶之间的结合事件的方法,所述方法包括:
(a)使样品与如权利要求1-8中任一项所述的阵列接触,其中所述样品包括包含所述靶的溶液;以及
(b)检测所述异源膜结合蛋白和所述靶之间的结合事件。
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