[发明专利]用于登革病毒疫苗的方法与组合物

说明书

本发明提供包含嵌合登革病毒E糖蛋白的组合物和使用方法，所述嵌合登革病毒E糖蛋白包含登革病毒E糖蛋白骨架，其包含引入被来自不同于该登革病毒E糖蛋白骨架的登革病毒血清型的登革病毒血清型的抗体识别的表位的氨基酸置换。

优先权声明

本申请依35 U.S.C.§119(e)要求2013年6月26日提交的美国临时申请系列号61/839,687的权益，其全部内容经此引用并入本文。

政府支持声明

以由国家健康研究所(National Institutes of Health)授予的Grant No.U54AI057157下的政府支持作出本发明。美国政府在本发明中享有某些权利。

技术领域

本发明涉及由单一来源诱导针对超过一种登革病毒血清型的中和抗体的登革病毒疫苗。

发明背景

登革是一种蚊媒黄病毒，正在以史无前例的速度传播并已经在超过50个国家发展成为主要的健康与经济负担。针对所有四种DENV血清型进行防护的现有DENV疫苗必须以四种病毒或四种重组蛋白的“四价”制剂形式递送(各自旨在提供针对该血清型的防护)。还不知道在四价鸡尾酒中血清型的正确组合以实现平衡的抗体应答，近来在泰国进行的大型2B期试验中最先进的四价减毒活嵌合病毒未能提供临床上有意义的防护也凸显了这一点(Sabchareon A等人，2012)。病毒干扰被认为促进了失败，因为一种或更多种病毒血清型胜过其它病毒血清型。该DENV-1/3和DENV 3/1嵌合病毒是呈现由来自DENV-1与DENV-3免疫个体的中和抗体识别的表位的单一病毒。这表明，单一病毒应当能够立刻引发针对两种血清型的中和抗体，用一种病毒(DENV-1/3或DENV-3/1)代替两种病毒(DENV-1和3)。

附图概述

图1A-B.对于DENV-1/3突变体，将来自DENV3的EDI-II铰链移植到DENV-1背景(WestPac’74)中，产生DENV-3/1铰链突变体。使用DENV3特异性人mAb 5J7定义该EDI-II铰链。A)针对单克隆抗体5J7测试所得病毒rDENV-1/3。该图显示了DENV-1并未被5J7中和，而DENV-3被5J7中和。仅含有该DENV-3EDI/II铰链的rDENV-1/3在等效于DENV-3中和浓度的浓度下被5J7中和。这表明该5J7表位成功移植到DENV-1中。B)该图块(panel)显示DENV-3并未被mAb 1F4中和，DENV-1被1F4中和，并且rDENV-1/3也被中和，表明1F4仍可以结合到该嵌合病毒上并中和该嵌合病毒。

图2A-B.该图显示了针对DENV-1、DENV-3和铰链嵌合病毒WestPac-3001铰链(rDENV-1/3)测试的初次DENV-1和DENV-3人免疫血清。该Y轴显示了中和组织培养中50％的输入病毒所需的免疫血清的稀释倍数。更高的值表示更有效的血清。A)DENV-1初次免疫血清有效地中和DENV-1，但是不能中和DENV-3。rDENV-1/3在类似于DENV-1的浓度下对被DENV-1免疫血清中和敏感，表明与亲代DENV-3病毒不同，该嵌合病毒显示被DENV-1免疫血清识别的表位。B)DENV-3初次免疫血清不中和DENV-1，但是中和DENV-3。rDENV-1/3在类似于DENV-3的浓度下被DENV-3初次免疫血清中和，表明该嵌合病毒rDENV-1/3保存了DENV-3人免疫血清中的DENV-3抗体所靶向(targeted)的关键DENV-3表位。*表明未被中和。

图3.该图显示了WestPac’74 3001-铰链在恒河猴中感染后第28、60、90、120和180天引发广泛交叉-中和抗体。Y轴显示如上的中和抗体效价。X轴显示各种病毒血清型。各绘制点是针对给定血清型对单一恒河猴的中和效价。贯穿点的各个群簇的中心线是针对各种血清型对各组猕猴的几何平均中和效价。须状线显示了平均值的标准误差。各个时间点(28、30、60、90、120、180天)显示了针对所有四种血清型的广泛交叉-中和抗体应答。