[发明专利]用于使血液样品成像的方法、试剂盒及系统

权利要求书

1.一种用于使血液样品成像的方法，所述方法包括：

-将包括红细胞的细胞悬浮液引入到载体的基底表面上，所述载体具有大于或等于当在所述基底表面上时所述细胞悬浮液的垂直高度h的垂直高度H；

-使所述细胞悬浮液中的细胞沉降在所述载体的所述基底表面上以在所述载体的基底表面上形成细胞单层，所述细胞悬浮液具有浓度C，所述浓度C是这样的，当使所述细胞悬浮液中基本上所有的细胞沉降在所述载体的所述基底表面上以形成所述细胞单层时，在所述基底表面上形成单层而在细胞间基本上无重叠；以及

-获取所述细胞单层的至少一部分的至少一幅显微图像，

其中，通过设置为不超过当沉降到所述基底表面上时所述细胞悬浮液的垂直高度的20％的景深的显微镜获得所述至少一幅显微图像。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述垂直高度h在20μm与1000μm之间。

3.如权利要求1所述的方法，其中通过设置为不大于当沉降在所述基底表面上时所述细胞悬浮液的垂直高度的15％的景深的显微镜获得所述至少一幅显微图像。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述景深在0.5μm与10μm之间。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述景深在0.5μm与5μm之间。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞是人细胞。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞包括至少50％红细胞。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞包括至少75％红细胞。

9.如权利要求1所述的方法，包括以稀释因子D稀释包括所述红细胞的样品以获得所述细胞悬浮液，所述稀释因子D是稀释前每一ml细胞的浓度C₀与所述浓度C的函数。

10.如权利要求9所述的方法，其中通过以下函数确定所述稀释因子D：

11.如权利要求9所述的方法，其中样品是血液样品且所述稀释因子D在50与300之间。

12.如权利要求9所述的方法，其中所述稀释因子D在75与200之间。

13.如权利要求9所述的方法，其中所述稀释因子D为约100。

14.如权利要求1所述的方法，包括通过稀释包括红细胞的血液样品生成所述细胞悬浮液以获得所述细胞悬浮液中的细胞浓度C，使得在沉降到所述基底表面上后，细胞的密度在10,000至30,000个细胞/mm²之间。

15.如权利要求14所述的方法，所述稀释包括使所述细胞悬浮液形成为具有在0.4与0.9之间的平均基底表面覆盖度的单层。

16.如权利要求15所述的方法，其中所述平均基底表面覆盖度在0.4与0.6之间。

17.如权利要求1所述的方法，包括选择提供所述景深的显微镜物镜透镜，其中所述透镜允许获取在其任一维度不大于3μm长的至少一个物体的图像。

18.如权利要求17所述的方法，其中所述透镜允许获取具有相对于所述基底表面不大于3μm的高度的至少一个物体的图像。

19.如权利要求1所述的方法，包括分析所述至少一幅图像以基于所述至少一幅图像确定所述细胞悬浮液中病原体的存在或不存在。