[发明专利]Mrap2敲除

说明书

如本文所述，Mrap2对动物的体重增加进行负调控。因此，本文提供了与抑制Mrap2以提高细胞和/或动物的生长速率相关的细胞、动物(例如包含Mrap2修饰的动物)和方法，从而改进动物产品的生产。

相关申请的交叉引用

根据35U.S.C§119(e)，本申请要求2013年7月10日提交的美国临时申请号61/844,666的权益，以引用的方式将其内容整体并入本文。

政府支持

本发明是在由国立卫生研究院授予的基金号NIHP30-HD18655和T32DK07699的联邦基金的支持下完成。美国政府对本发明享有一定的权利。

序列表

本申请包含序列表，所述序列表已经以ASCII格式电子提交，并在此以引用的方式将其整体并入。所述ASCII副本创建于2014年6月27日，命名为068570-078611-PCT_SL.txt，大小为25,182字节。

技术领域

本文所述的技术涉及敲除和转基因动物。

背景技术

当为了例如食用或育种的目的饲养动物时，相关成本的显著贡献因素是使动物成熟至所需大小和/或体重所花费的时间。动物越快达到所需的大小和/或体重，饲养动物的相关成本就越低，并且生产功能性动物(functional animal)消耗的资源越少。畜牧业通常通过以鼓励快速生长的方式控制饲料、环境和兽医护理，以寻求将这一时间最小化。此外，动物饲料是使动物得以出售的主要成本，因此，力求提高的“饲料效率(动物生长的重量/所消耗的食物重量)”，以降低家畜的成本。

发明内容

如本文所述，本发明人发现，与野生型动物相比，通过抑制动物中的Mrap2的水平和/或活性，动物以非常快的速率增重。事实上，动物能够比野生型动物更快多达50％到达成熟成体大小。进而，当限制至较少的饮食时，缺少Mrap2活性的动物能够与野生型动物生长的同样快。因此，本文描述的是具有Mrap2修饰的细胞、包含这些细胞的动物、以及利用此类动物以提供动物产品的更高效生产的方法。

一方面，本文描述的为包含Mrap2基因修饰的非人哺乳动物细胞，其中，该细胞不表达可检测水平的功能性Mrap2。在一些实施方式中，该修饰包括Mrap2编码序列的缺失。在一些实施方式中，该修饰包括Mrap2基因外显子3的缺失。在一些实施方式中，该修饰包括Mrap2跨膜结构域的缺失。在一些实施方式中，该修饰包括Mrap2胞内结构域的缺失。在一些实施方式中，该修饰包括SEQ ID NO：1的至少一个氨基酸的突变(或编码此氨基酸的至少一个核苷酸的突变，例如点突变、SNP等)。

在一些实施方式中，对于修饰而言，细胞为杂合子。在一些实施方式中，对于修饰而言，细胞为纯合子。在一些实施方式中，非人哺乳动物细胞属于选自于由猪、奶牛(cow)、绵羊、兔和山羊所组成的组中的物种。

在一些实施方式中，修饰通过CRISPR、TALEN或ZFN核酸酶的作用产生。在一些实施方式中，修饰通过重组酶的作用产生。在一些实施方式中，重组酶为cre重组酶。在一些实施方式中，重组酶处于组织特异性启动子的控制下。在一些实施方式中，启动子对神经元或脑组织而言是特异性的。在一些实施方式中，启动子为Sim1启动子。

在一些实施方式中，修饰为工程化修饰，例如非天然存在的修饰。本文中使用的“工程化的”是指人为操作的方面。例如，当通过人为操作将天然状态下未以该顺序连接在一起的两个以上的序列直接彼此连接为工程化的多核苷酸时，可认为该多核苷酸是“工程化的”。通过进一步的实例，当改变多核苷酸序列(例如通过缺失)以使该序列与天然发现的不同时，可认为该多核苷酸为“工程化的”。如本领域技术人员所理解和惯常实践的，即使对在先的本体(prior entity)进行实际操作，通常仍将工程化的多核苷酸的子代和拷贝称为“工程化的”。