[发明专利]桥粒芯糖蛋白2(DSG2)结合蛋白质及其用途

说明书

交叉引用

本申请要求2013年9月24日提交的PCT专利申请系列No.PCT/US13/61431和2014年3月18日提交的美国临时专利申请系列No.61/954822的优先权，这些申请的全部内容以引用方式并入本文。

政府权利的声明

本发明是在美国国立卫生研究院(the National Institutes of Health)授予的R01CA080192和RO1HLA078836下由美国政府资助而作出的。在本发明中，美国政府具有某些权利。

背景技术

人类腺病毒(Ad)已经分成6种类型(A至F)，目前包含51种血清型。大部分的Ad血清型使用了柯萨奇病毒蛋白受体(CAR)作为主要的附着受体(Bergelson et al.,1997)。但是，B类Ad血清型不这样。最近，我们基于它们受体的使用，研究了新的一组B类Ad(Tuve et al.,2006)。1组(Ad16,21,35,50)几乎专门使用CD46作为受体；2组(Ad3,Ad7,14)共用一个或多个普通的未识别的受体，该受体并非为CD46并且其暂时命名为受体X；3组(Ad11)优选地与CD46相互作用，而且如果CD46被阻断，则还使用受体X。

B类Ad是常见的人类病原体。自从2005年以来，观察到在大部分的美国军事训练场中同时出现多种B类血清型。其包含血清型Ad3,Ad7和Ad14(Metzgar et al.,2007)。在2007年，已经在美国和亚洲的多处发现一种新型的高度致病的毒株且可能更有毒的毒株Ad14(Ad14a)(Louie et al.,2008；Tate et al.,2009)。近来，根据Ad14a的受体的使用，我们证明Ad14a属于B类2组Ad(Wang et al.,2009)。总而言之，所有使用受体X的血清型(Ad3,Ad7,Ad14,Ad14a,和Ad11)在本文中均称为AdB-2/3。

AdB-2/3作为基因转移载体与上皮起源的肿瘤(其代表了大部分的实体肿瘤)具有显著的相关性(Yamamoto and Curiel,2010)。上皮细胞保持了多种细胞间连接和顶底极性。上皮细胞的重要特征在原位上皮癌和癌细胞系中是保守的(Turley et al.,2008)。CAR和CD46通常陷于上皮癌细胞的紧密和粘附连接中，并且未接近使用这些附着受体的Ad(Coyne and Bergelson,2005；Strauss et al.,2009)。相反，AdB-2/3高效地感染上皮癌细胞，这是部分通过诱导可以想象的上皮细胞向间充质细胞转化(EMT)的过程来实现的(Strauss et al.,2009)。AdB-2/3的另一个与众不同的特征是它们能够在复制过程中产生亚病毒十二面体颗粒，其由Ad纤维和五邻体基体组成(Norrby et al.,1967)。五邻体-十二面体(PtDd)不能由全长的五邻体基体蛋白质组装，但是必须在残基37和38之间通过蛋白质水解自发地进行N-末端截短(Fuschiotti et al.,2006)。该切割位点在Ad3,Ad7,Ad11和Ad14中是保守的，但是在Ad2和Ad5中不存在。在Ad3的情况下，以大量过量的5.5×10⁶PtDd/感染病毒的量形成PtDd(Fender et al.,2005)，并且已经表明PtDd通过破坏细胞间连接而增强Ad3的感染性，由此有利于病毒的传播(Walters et al.,2002)。

发明概述

在一个方面中，本发明提供了分离的多肽，其包含SEQ ID NO:1-11的任意一项所述的氨基酸序列。在另一个方面中，本发明提供了重组AdB-2/3纤维多肽，其包含：

(a)一个或多个AdB-2/3纤维多肽杆结构域、杆结构域基元或其功能等价物；

(b)与一个或多个AdB-2/3纤维多肽杆结构域可操作地连接的并且位于该AdB-2/3纤维多肽杆结构域或杆结构域基元的C-末端的AdB-2/3纤维多肽球结构域，其中所述的AdB-2/3纤维多肽球结构域包含任意一个SEQ ID NO:1-11的多肽；以及

(c)与一个或多个AdB-2/3纤维多肽杆结构域可操作地连接的并且位于该AdB-2/3纤维多肽杆结构域或杆结构域基元的N-末端的一个或多个非AdB-2/3衍生的二聚化结构域。