[发明专利]用于功能性核酸酶的投递系统

权利要求书

1.一种包含与功能性效应器蛋白联合的超电荷蛋白的组合物，其中所述超电荷蛋白具有大于其相应未经修饰蛋白的总体正电荷并且为充足的量，并且配制为用于穿透入细胞中。

2.权利要求1的组合物，其中所述功能性效应器蛋白是核酸酶。

3.权利要求2的组合物，其中所述核酸酶是可RNA编程的核酸酶。

4.权利要求3的组合物，其中所述核酸酶是TALE核酸酶、Cas9核酸酶或锌指核酸酶。

5.权利要求2-4中任一项的组合物，其中所述核酸酶特异性结合并切割核酸序列。

6.权利要求5的组合物，其中所述核酸序列包含在与疾病或病症有关的基因或等位基因中。

7.权利要求5或6的组合物，其中所述组合物还包含核酸分子，所述核酸分子包含与由所述核酸酶结合并切割的核酸序列相同或同源的序列。

8.权利要求中5-7任一项的组合物，其中所述核酸序列是包含在基因中的序列，所述基因是治疗靶物。

9.权利要求8的组合物，其中所述基因是控制细胞命运的基因。

10.权利要求9的组合物，其中所述基因是诱导或抑制朝向褐色脂肪细胞细胞命运的细胞程序化的基因。

11.权利要求9或10的组合物，其中所述基因是PRDM16或PPARγ。

12.权利要求1的组合物，其中所述功能性效应器蛋白是转录因子。

13.权利要求1的组合物，其中所述功能性效应器蛋白是TALE转录激活物或阻遏物。

14.权利要求12或13的组合物，其中所述转录因子、转录激活物或转录阻遏物特异性结合并激活或抑制基因。

15.权利要求14的组合物，其中所述基因是治疗靶物。

16.权利要求1的组合物，其中所述功能性效应器蛋白是TALE效应器。

17.权利要求1-16中任一项的组合物，其中所述超电荷蛋白经由共价键与所述功能性效应器蛋白联合，从而形成融合蛋白。

18.权利要求1-17中任一项的组合物，其中所述超电荷蛋白经由接头与功能性效应器蛋白联合。

19.权利要求18的组合物，其中所述接头是可切割接头。

20.权利要求19的组合物，其中所述接头是UV可切割接头或由溶酶体酶切割的接头。

21.权利要求1-16中任一项的组合物，其中所述超电荷蛋白经由非共价相互作用与功能性效应器蛋白联合，从而形成复合物。

22.权利要求21的组合物，其中所述超电荷蛋白具有总体净正电荷。

23.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+5。

24.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+10。

25.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+15。

26.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+20。

27.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+25。

28.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+30。

29.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+35。

30.权利要求21的组合物，其中所述总体净正电荷为约+40。

31.权利要求1-30中任一项的组合物，其中所述超电荷蛋白在生理学pH比其相应未经修饰的蛋白带更多的正电荷。

32.权利要求31的组合物，其中所述相应未经修饰的蛋白是天然存在的蛋白。

33.权利要求1-32中任一项的组合物，其中所述超电荷蛋白在生理学pH比其相应未经修饰的蛋白至少多带+5个正电荷。

34.权利要求1-32中任一项的组合物，其中所述超电荷蛋白在生理学pH比其相应未经修饰的蛋白至少多带+10个正电荷。