[发明专利]修饰的抗表皮生长因子受体抗体及其使用方法

权利要求书

1.修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其在未修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段的可变重链(VH)中包含氨基酸置换，所述氨基酸置换对应于参照SEQIDNO:2或7所示氨基酸位置的第104位的位置处的谷氨酸(E)置换，其中：

通过将所述抗体的可变重链与SEQIDNO:2或7所示的可变重链比对，鉴定氨基酸位置；

所述未修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段选自：

i)西妥昔单抗或其抗原结合片段，其包含SEQIDNO:2或7所示的可变重链和SEQIDNO:4、9或11所示的可变轻链；

ii)抗体或其抗原结合片段，其与i)的抗体或其抗原结合片段呈现至少80％的序列相同性；以及

iii)i)或ii)的人源化形式；以及

所述修饰的抗-EGFR抗体特异性结合表皮生长因子受体(EGFR)或其可溶片段。

2.权利要求1的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其与i)的抗体或其抗原结合片段呈现至少85％的序列相同性。

3.权利要求1或2的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述未修饰的抗-EGFR抗体包含：

SEQIDNO:2所示的可变重链和SEQIDNO:4所示的可变轻链；或者

SEQIDNO:7所示的可变重链和SEQIDNO:9或11所示的可变轻链。

4.权利要求1-3任一项的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述未修饰的抗体或其抗原结合片段是人源化的。

5.权利要求4的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其中所述人源化的未修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段包含：

SEQIDNO:14所示的可变重链和SEQIDNO:15所示的可变轻链；或者

SEQIDNO:16所示的可变重链和SEQIDNO:17所示的可变轻链。

6.权利要求1-5任一项的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其为全长抗体。

7.权利要求1-5任一项的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其为选自Fab、Fab’、F(ab’)₂、单链Fv(scFv)、Fv、dsFv、双特异抗体、Fd和Fd’片段的抗原结合片段。

8.权利要求1-7任一项的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其包含：

a)可变重(VH)链，所述可变重链包含SEQIDNO:74或75所示的氨基酸序列或与SEQIDNO:74或75呈现至少85％、90％或95％序列相同性的氨基酸序列；以及

b)可变轻(VL)链，所述可变轻链包含SEQIDNO:4、9或11所示的氨基酸序列或与SEQIDNO:4、9或11呈现至少85％、90％或95％序列相同性的氨基酸序列。

9.权利要求1-8任一项的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其为全长IgG抗体，其中所述修饰的抗-EGFR抗体包含：

a)重链或其变体，所述重链包含SEQIDNO:72所示的氨基酸序列，所述变体与SEQIDNO:72呈现至少85％、90％或95％的序列相同性；以及

b)轻链或其变体，所述轻链包含SEQIDNO:3、8、10或13所示的氨基酸序列，所述变体与SEQIDNO:3、8、10或13呈现至少85％、90％或95％的序列相同性。

10.权利要求8或9的修饰的抗-EGFR抗体或其抗原结合片段，其中：

除了在重链中对应第104位的位置处的E置换之外，所述修饰的抗体在SEQIDNO:74或75所示的可变重链和/或在SEQIDNO:4、9或11所示的轻链中包含多达1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸置换，或者

除了在重链中对应第104位的位置处的E置换之外，所述修饰的抗体在SEQIDNO:72所示的重链和/或在SEQIDNO:3、8、10或13所示的轻链中包含多达1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸置换。