[发明专利]产生免疫细胞缺陷型小型猪的方法及等位基因突变的细胞有效
申请号: | 201480062483.6 | 申请日: | 2014-11-13 |
公开(公告)号: | CN105764335B | 公开(公告)日: | 2019-05-28 |
发明(设计)人: | 金珍会;权得男;李基豪;R·S·普莱特尔 | 申请(专利权)人: | 建国大学校产业学校协力团;密苏里大学管委会 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;A01K67/027 |
代理公司: | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人: | 景鹏;姚开丽 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 白介素 受体 基因 打靶 载体 引入 免疫 细胞 缺陷 转基因 克隆 小型 产生 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于产生免疫细胞缺陷型转基因克隆的小型猪的方法,所述免疫细胞缺陷型转基因克隆的小型猪在白介素2受体γ(IL2RG)中具有等位基因突变,所述方法包括以下步骤:
使用TALEN(转录激活样效应因子核酸酶)处理猪的染色体X上的由SEQ ID NO:1所示的TALEN识别序列位点,以诱导等位基因突变;以及
使用具有诱导的等位基因突变的细胞,通过体细胞核移植(SCNT)产生突变体胚胎,
其中,所述TALEN识别序列位点是SEQ ID NO:1的第1~19位核酸和SEQ ID NO:1的第32~50位核酸。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,使用编码TAL效应因子核酸酶的载体转染感兴趣的细胞,来进行TALEN对所述TALEN识别序列位点的处理。
3.一种具有等位基因突变的细胞,所述等位基因突变是通过使用TALEN(转录激活样效应因子核酸酶)处理猪的染色体X上的由SEQ ID NO:1所示的TALEN识别序列位点来诱导的,
其中,所述TALEN识别序列位点是SEQ ID NO:1的第1~19位核酸和SEQ ID NO:1的第32~50位核酸。
4.根据权利要求3所述的细胞,所述细胞是IL2RG敲除的小型猪的成纤维细胞系KCTC12497。
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