[发明专利]具有人源化的增殖诱导配体基因的非人动物

说明书

提供了非人动物、细胞、用于产生和使用其的方法和组合物，其中所述非人动物和细胞包含人源化的增殖诱导配体基因。描述了从内源增殖诱导配体基因座表达人或人源化的增殖诱导配体蛋白的非人动物和细胞。

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年11月19日提交的美国临时申请号61/905,986(其整个内容通过引用并入本文)的优先权的权益。

通过引用并入序列表

将于2014年11月5日创建的并经由EFS-Web提交至美国专利商标局的以ASCII文本文件存在的序列表(名称为31016_6825_SEQ.txt，32KB字节)通过引用并入本文。

背景

当生物体的用于防止其免疫系统攻击其自身的细胞和组织的天然机制崩溃时，导致自身免疫。由崩溃以及由所导致的异常自身定向免疫应答引起的疾病、病症和病况被称为自身免疫性疾病。自身免疫性疾病、病症和病况的显著实例包括糖尿病、系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)和一些过敏症。自身免疫性疾病据估计是死亡的十大主要原因之一。用于自身免疫性疾病的治疗的开发的投资在数十亿美元的范围内，并且测试、开发和验证候选治疗剂的关键体内系统是确保治疗安全性和有效性所必需的。此外，这样的体内系统在确定新的治疗是否能够维持患者的长期改善以及可能地是否可甚至为许多仍未得到解决的疾病提供治愈的过程中是必需的。这样的体内系统还为在体内进行的人造血和免疫系统相关功能的测定、新型疗法和疫苗的鉴定提供了来源。

发明简述

本发明包括这样的认识：期望工程改造非人动物以提供改善的体内自身免疫性疾病系统以允许测试、开发和验证新的和现有的候选治疗剂。本发明还包括这样的认识：期望工程改造非人动物以允许在来自人供体的人造血干细胞或B细胞的免疫后和植入后人淋巴细胞(例如，B细胞)的活化和存活得到改善。本发明还包括这样的认识：期望具有人源化April基因和/或另外地表达、含有或产生人或人源化April蛋白的非人动物例如用于来自人供体的人造血干细胞或B细胞的植入。

在一些实施方案中，本发明的非人动物表达包含连接至非人April蛋白的细胞内部分的人APRIL蛋白的细胞外部分的April多肽。

在一些实施方案中，人APRIL蛋白的细胞外部分由人APRIL基因的外显子2至6编码。

在一些实施方案中，人APRIL基因的外显子2至6与表3中显示的人APRIL基因的外显子2至6具有至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少98％的同一性。在一些实施方案中，人APRIL基因的外显子2至6与表3中显示的人APRIL基因的外显子2至6具有100％的同一性。

在一些实施方案中，本发明的非人动物不以可检测方式表达全长内源April蛋白。在一些实施方案中，所述非人动物是啮齿动物并且不以可检测方式表达全长啮齿动物April蛋白。在一些实施方案中，所述非人动物是小鼠并且不以可检测方式表达其序列示于表3中的全长小鼠April蛋白。

在一些实施方案中，本发明的April多肽从内源非人April基因座上的经遗传修饰的April基因表达。在某些实施方案中，经遗传修饰的April基因包含非人April外显子1。在某些实施方案中，经遗传修饰的April基因包含完整或部分的非人April外显子6。在某些实施方案中，经遗传修饰的April基因包含完整或部分的非人April外显子1、非人April外显子6或其组合。在多个实施方案中，部分的非人April外显子6包含非人April 3’非翻译区(UTR)和非人April多腺苷酸化信号。