[发明专利]免疫层析辅助的检测方法

说明书

本发明提供一种使用免疫层析测试条的检测方法，所述方法表现出高准确度和灵敏度，同时使“漂白(white streaking)”的发生率最小化。本发明提供一种免疫层析辅助的检测方法，其涉及免疫层析测试条的使用。所述免疫层析测试条具有：(1)具有样品供应部和在所述样品供应部下游的缀合物部的缀合物垫，所述样品供应部用于供应可能包含要检测的物质的样品，所述缀合物部包含其中针对要检测的物质的抗体固定在标记上的缀合物；和(2)具有至少一个检测部的不溶性膜载体，在所述检测部上固定有针对要检测的物质的抗体。所述检测方法包括(A)向所述样品供应部提供甲醇和可能包含要检测的物质的样品的步骤，和(B)在所述不溶性膜载体上检测作为免疫反应产物的要检测的物质的步骤。

技术领域

本发明涉及一种免疫层析检测方法。本发明还涉及一种用于检测B型流感病毒的方法。

背景技术

已知使用免疫层析测试条的检测方法是一种通过抗原-抗体反应检测样品中的分析物(要检测的物质)的方法。免疫层析是一种这样的方法，其包括：将由分析物和其中固定了针对所述分析物的抗体的标记的缀合物(所述标记的缀合物也可以称为缀合物)形成的免疫复合物与移动相(诸如缓冲液)一起经由固定相展开，所述固定相是一种具有检测部的不溶性膜支持物，在所述检测部上固定了针对所述分析物的抗体作为捕获剂，从而检测由所述捕获剂捕获的免疫复合物。胶体金属颗粒，诸如胶体金，和着色的胶乳颗粒，用作标记，并且检测部的着色程度可以用来确定样品中分析物的存在，和在一些情形中，确定样品中的分析物量。

免疫层析测试条的典型构造是这样的构造：其具有用于供应样品的样品供应部(以下还称为样品垫)，用于放置缀合物的缀合物垫，和检测部，所述检测部具有固定成线形的捕获剂，诸如抗体，并且与不溶性膜载体一起放置，用于通过允许其随着移动相展开而捕获前述免疫复合物，和用于在检测部下游侧吸附经过不溶性膜支持物展开的样品的吸附垫。

在具有前述构造的免疫层析测试条的检测部中检测分析物与缀合物之间的复合物的方法包括测量由标记反射的光的强度从而计算吸光度(反射吸收)的方法。反射吸收通过使用在检测部和其两个相邻部分中分析物的检测线处测量的反射光强度的比率而计算。然而，当使用该方法时，由于在检测免疫复合物所在的检测线上游侧和下游侧(特别是下游侧)的附近，反射光强度非特异性增加，测量波形可能受到干扰。当使用包含低浓度分析物的样品并且检测前述复合物时，由于测量波形的干扰而不能画出基线，并且，因此，不能准确检测特异性信号(峰)，这可能使得测量本身是不可能的。由于这种测量波形干扰发生的频率和测量波形干扰的程度或水平不是恒定的，测量的再现性降低，并且在每次测量中必须进行适当的测量值的校正(换言之，测量波形的验证)。

在使用白色膜的常用免疫层析中，测量波形的干扰在视觉上可以观察为这样的现象：其中在膜上相对应的部分看起来比周围的颜色相对更白，如同该部分被漂白了(所谓的漂白现象；以下还简称为漂白现象或漂白)。

尽管不清楚所述漂白现象的原因，但是，当在长时间保存(例如，一年以上)后使用免疫层析测试条时，经常观察到该现象。还不知晓消除此种漂白现象的方法。

另一方面，尽管免疫层析已经在大量的快速临床检测(护理点检测)中付诸实际应用并且特别广泛地用于传染病(如流感)的诊断，但是，如使用其他免疫测定(如LTIA)的情形，免疫层析具有对B型流感病毒的低检测灵敏度的问题，并且还不知晓消除该问题的方法。

引用列表

专利文献

专利文件1:WO 2012/043746

发明概述

技术问题

本发明的目的是提供一种能够抑制测试条上所谓的漂白现象的发生的用于更准确的检测的免疫层析检测方法。本发明还有一个目的是提供一种增强检测灵敏度、特别是用于B型流感病毒的检测灵敏度的免疫层析检测方法。

问题的解决方案