[发明专利]修饰型β-半乳糖苷酶

权利要求书

1.一种修饰型β－半乳糖苷酶，由将β－半乳糖苷酶中的85位的色氨酸（W85）、91位的苯丙氨酸（F91）、103位的酪氨酸（Y103）、134位的酪氨酸（Y134）、153位的酪氨酸（Y153）、182位的脯氨酸（P182）、186位的色氨酸（W186）、192位的酪氨酸（Y192）、295位的酪氨酸（Y295）、345位的组氨酸（H345）、349位的甘氨酸（G349）、402位的苯丙氨酸（F402）、407位的谷氨酰胺（Q407）、479位的甘氨酸（G479）、480位的谷氨酸（E480）、482位的赖氨酸（K482）、483位的苏氨酸（T483）、484位的精氨酸（R484）、485位的甘氨酸（G485）、486位的天冬氨酸（D486）、487位的赖氨酸（K487）、488位的缬氨酸（V488）、496位的酪氨酸（Y496）、512位的丝氨酸（S512）、513位的谷氨酸（E513）、514位的天冬酰胺（N514）、515位的天冬酰胺（N515）、516位的酪氨酸（Y516）、517位的天冬氨酸（D517）、519位的酪氨酸（Y519）、533位的苏氨酸（T533）、547位的酪氨酸（Y547）、549位的酪氨酸（Y549）、555位的酪氨酸（Y555）、572位的精氨酸（R572）、573位的苏氨酸（T573）、598位的酪氨酸（Y598）、605位的酪氨酸（Y605）、606位的酪氨酸（Y606）、609位的酪氨酸（Y609）、616位的苯丙氨酸（F616）、624位的苯丙氨酸（F624）、648位的色氨酸（W648）或650位的色氨酸（W650）置换成其它的氨基酸而得的氨基酸序列构成，其中，所述β－半乳糖苷酶由序列号1～4中任一个氨基酸序列构成，

85位的色氨酸（W85）的置换后的氨基酸是甘氨酸，91位的苯丙氨酸（F91）的置换后的氨基酸是丙氨酸或者异亮氨酸，103位的酪氨酸（Y103）的置换后的氨基酸是甘氨酸，134位的酪氨酸（Y134）的置换后的氨基酸是甘氨酸，153位的酪氨酸（Y153）的置换后的氨基酸是甘氨酸，182位的脯氨酸（P182）的置换后的氨基酸是色氨酸或者酪氨酸，186位的色氨酸（W186）的置换后的氨基酸是甲硫氨酸，192位的酪氨酸（Y192）的置换后的氨基酸是甘氨酸，295位的酪氨酸（Y295）的置换后的氨基酸是甘氨酸，345位的组氨酸（H345）的置换后的氨基酸是甘氨酸，349位的甘氨酸（G349）的置换后的氨基酸是色氨酸，402位的苯丙氨酸（F402）的置换后的氨基酸是甘氨酸，407位的谷氨酰胺（Q407）的置换后的氨基酸是异亮氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸或者酪氨酸，479位的甘氨酸（G479）的置换后的氨基酸是亮氨酸、脯氨酸或者谷氨酰胺，480位的谷氨酸（E480）的置换后的氨基酸是天冬酰胺，482位的赖氨酸（K482）的置换后的氨基酸是甲硫氨酸或者缬氨酸，483位的苏氨酸（T483）的置换后的氨基酸是甘氨酸或者丝氨酸，484位的精氨酸（R484）的置换后的氨基酸是苯丙氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺或者谷氨酰胺，485位的甘氨酸（G485）的置换后的氨基酸是天冬氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺或者苏氨酸，486位的天冬氨酸（D486）的置换后的氨基酸是丙氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、苏氨酸、色氨酸或者酪氨酸，487位的赖氨酸（K487）的置换后的氨基酸是半胱氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、精氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸或者酪氨酸，488位的缬氨酸（V488）的置换后的氨基酸是甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸或者酪氨酸，496位的酪氨酸（Y496）的置换后的氨基酸是甘氨酸，512位的丝氨酸（S512）的置换后的氨基酸是半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺或者色氨酸，513位的谷氨酸（E513）的置换后的氨基酸是丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、丝氨酸、苏氨酸或者缬氨酸，514位的天冬酰胺（N514）的置换后的氨基酸是谷氨酸、亮氨酸或者赖氨酸，515位的天冬酰胺（N515）的置换后的氨基酸是丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、脯氨酸或者缬氨酸，516位的酪氨酸（Y516）的置换后的氨基酸是色氨酸，517位的天冬氨酸（D517）的置换后的氨基酸是赖氨酸或者色氨酸，519位的酪氨酸（Y519）的置换后的氨基酸是甘氨酸，533位的苏氨酸（T533）的置换后的氨基酸是谷氨酸，547位的酪氨酸（Y547）的置换后的氨基酸是甘氨酸，549位的酪氨酸（Y549）的置换后的氨基酸是甘氨酸，555位的酪氨酸（Y555）的置换后的氨基酸是甘氨酸，572位的精氨酸（R572）的置换后的氨基酸是半胱氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苏氨酸、色氨酸或者酪氨酸，573位的苏氨酸（T573）的置换后的氨基酸是谷氨酸，598位的酪氨酸（Y598）的置换后的氨基酸是组氨酸或者天冬酰胺，605位的酪氨酸（Y605）的置换后的氨基酸是半胱氨酸、天冬氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、脯氨酸、精氨酸或者苏氨酸，606位的酪氨酸（Y606）的置换后的氨基酸是丙氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸或者丝氨酸，609位的酪氨酸（Y609）的置换后的氨基酸是谷氨酸、天冬酰胺或者丝氨酸，616位的苯丙氨酸（F616）的置换后的氨基酸是甘氨酸，624位的苯丙氨酸（F624）的置换后的氨基酸是甘氨酸，648位的色氨酸（W648）的置换后的氨基酸是甘氨酸，650位的色氨酸（W650）的置换后的氨基酸是甘氨酸，生成三糖以上的含有率为与野生型酶同等的程度且四糖的含有率比野生型酶少的低聚糖。