[发明专利]细胞测量机构和具有该细胞测量机构的细胞培养装置以及细胞测量方法有效
申请号: | 201480082245.1 | 申请日: | 2014-10-22 |
公开(公告)号: | CN107075437B | 公开(公告)日: | 2019-12-03 |
发明(设计)人: | 河原井雅子;樱井智也;岛濑明大;越裕之 | 申请(专利权)人: | 株式会社日立高新技术 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;G01N15/14;G01N21/49;G01N33/48;G01N33/483 |
代理公司: | 11243 北京银龙知识产权代理有限公司 | 代理人: | 金鲜英;陈彦<国际申请>=PCT/JP2 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 测量 机构 具有 细胞培养 装置 以及 测量方法 | ||
1.一种细胞测量机构,其特征在于,具有:
使细胞悬浮液流通的流路,
将所述流路内的细胞悬浮液进行输送的液体驱动部,
运算部,基于从光源向在所述流路内流动中的细胞悬浮液进行照射光的照射所得到的前向散射光强度以及透过率和侧向散射光强度,求出至少所述细胞悬浮液中的细胞存活率,以及
测定部,所述测定部具有:流通所述细胞悬浮液的流体单元,按照与在所述流体单元中流通的细胞悬浮液的流动方向正交的方式配设的光源,隔着所述流体单元而与所述光源相对设置、配置在来自所述光源的照射光的光轴上的透过率检测器,在所述透过率检测器侧、根据活细胞的粒径相对于所述照射光的光轴具有所规定的角度而配设的前向散射光检测器,以及按照与所述细胞悬浮液的流动方向和所述照射光的光轴这二者正交的方式配设的侧向散射光检测器,
所述运算部具有校正曲线数据库,所述校正曲线数据库预先存储:表示活细胞浓度与所述前向散射光强度的关系的第一校正曲线,表示死细胞浓度与所述透过率的关系的第二校正曲线,以及表示细胞存活率与所述侧向散射光强度的关系的第三校正曲线。
2.根据权利要求1所述的细胞测量机构,其特征在于,
所述运算部基于由所述前向散射光检测器测定的前向散射光强度和所述第一校正曲线,求出所述细胞悬浮液中的活细胞浓度,
基于由所述透过率检测器测定的透过率和所述第二校正曲线,求出所述细胞悬浮液中的死细胞浓度,
基于所述求出的活细胞浓度和死细胞浓度,求出所述细胞悬浮液中的细胞存活率。
3.根据权利要求1所述的细胞测量机构,其特征在于,
所述前向散射光检测器配设于相对于所述照射光的光轴为5°~45°的角度范围内,
所述运算部基于由所述前向散射光检测器测定的前向散射光强度和所述第一校正曲线,求出所述细胞悬浮液中的活细胞浓度或活细胞数。
4.根据权利要求1所述的细胞测量机构,其特征在于,
将仅细胞培养液在所述流体单元流通时测定的透过率作为基线预先存储,将在所述细胞培养液中包含培养细胞的所述细胞悬浮液在所述流体单元流通时测定的透过率作为与所述基线的差分而输出。
5.根据权利要求1所述的细胞测量机构,其特征在于,
所述运算部基于由所述前向散射光检测器测定的前向散射光强度和所述第一校正曲线,求出所述细胞悬浮液中的活细胞浓度,
基于由所述透过率检测器测定的透过率和所述第二校正曲线,求出所述死细胞浓度,
基于所述求出的活细胞浓度和死细胞浓度,修正所述第三校正曲线,并且
基于修正后的第三校正曲线和由所述侧向散射光检测器测定的侧向散射光强度,求出所述细胞悬浮液中的细胞存活率。
6.一种细胞培养装置,其特征在于,具备:
培养细胞并使细胞增殖、并将增殖的细胞剥离的扩增培养机构;以及
细胞测量机构,该细胞测量机构具有:
使含有由所述扩增培养机构剥离的细胞的细胞悬浮液流通的流路;
将所述流路内的细胞悬浮液进行输送的液体驱动部;
运算部,该运算部基于从光源向在所述流路内流动中的细胞悬浮液进行照射光的照射所得到的前向散射光强度以及透过率和侧向散射光强度,计算至少所述细胞悬浮液中的细胞存活率;以及
测定部,所述测定部具有:流通所述细胞悬浮液的流体单元,按照与在所述流体单元中流通的细胞悬浮液的流动方向正交的方式配设的光源,隔着所述流体单元而与所述光源相对设置、配置在来自所述光源的照射光的光轴上的透过率检测器,在所述透过率检测器侧、根据活细胞的粒径相对于所述照射光的光轴具有所规定的角度而配设的前向散射光检测器,以及按照与所述细胞悬浮液的流动方向和所述照射光的光轴这两者正交的方式配设的侧向散射光检测器,
所述运算部具有校正曲线数据库,所述校正曲线数据库预先存储:表示活细胞浓度与所述前向散射光强度的关系的第一校正曲线,表示死细胞浓度与所述透过率的关系的第二校正曲线,以及表示细胞存活率与所述侧向散射光强度的关系的第三校正曲线。
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