[发明专利]芋螺毒素多肽κ-CPTx-bt104、其制备方法及应用

权利要求书

1.一种芋螺毒素多肽κ-CPTx-bt104，其特征在于，所述芋螺毒素多肽由11个氨基酸组成，所述芋螺毒素多肽的分子量为1313.47道尔顿，所述芋螺毒素多肽的氨基酸全序列为SLCCPEDRWCC。

2.权利要求1所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：(1)芋螺毒素多肽的提取；(2)芋螺毒素多肽的检测；(3)芋螺毒素多肽的富集；(4)芋螺毒素多肽的分离、测序以及序列选取。

3.根据权利要求2所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所芋螺毒素多肽的提取包括：从桶形芋螺中取出毒管，置于多肽提取液中，混合离心分离，取上清液冷冻抽干。

4.根据权利要求3所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述多肽提取液包括30％乙腈加0.1％三氟乙酸的去离子水溶液，以及蛋白酶抑制剂。

5.根据权利要求2所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述芋螺毒素多肽的检测包括：将提取得到的芋螺毒素多肽用8M尿素溶液复溶，再检测所芋螺毒素多肽的蛋白含量和分子量分布。

6.根据权利要求2所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述芋螺毒素多肽的富集包括：将检测后的芋螺毒素多肽进行还原烷基化处理，再经过萃取柱富集得到芋螺毒素多肽。

7.根据权利要求6所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述还原烷基化处理包括：加入终浓度为10mM的二硫苏糖醇，在56℃下反应1h，冷却至室温后，加入终浓度为55mM的碘代乙酰胺，在室温暗室反应45min。

8.根据权利要求2所述的芋螺毒素多肽的制备方法，其特征在于，所述芋螺毒素多肽的分离、测序以及序列选取包括：将富集得到的芋螺毒素多肽采用强阳离子交换高效液相色谱进行分离，再采用纳升高效液相色谱-质谱联用仪进行多肽质谱检测，根据质谱检测产生的质谱数据进行数据解析和生物信息分析，得到芋螺毒素多肽完整的氨基酸序列。

9.权利要求1所述的芋螺毒素多肽在制备钾离子通道阻断剂中的应用。