[发明专利]miRNA410‑在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因治疗和医学诊断领域，具体涉及一种miRNA410-在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用。

背景技术

前列腺癌是发生于男性前列腺组织中的恶性肿瘤，是前列腺腺泡细胞异常无序生长的结果。在欧美等发达国家和地区，它是男性最常见的恶性肿瘤，其死亡率居各种癌症的第二位；在亚洲，其发病率低于西方国家，但近年来呈迅速上升趋势。上海2007年前列腺癌在泌尿生殖系统恶性肿瘤的发病率已经从第3位跃居首位，并在男性十大肿瘤排名中由原来的第9位迅速上升至第5位。据预测，10年后，上海市前列腺癌发病率在男性恶性肿瘤中的排行将晋升至前三位。

与其它癌症一样，前列腺癌的早期诊断对前列腺癌病人治疗效果及生存质量有极为重大的意义。有研究指出，通过血清指标检测出来的极早期前列腺癌，其治疗效果较好，生存率有明显提升，生存质量影响较小。但是对于晚期前列腺癌患者(格里森评分>7)，其治疗后不仅生存率没有提高，而且生活质量影响较大。所以，前列腺癌的治疗成功与否，与早期诊断是否成功有较大联系。

目前公认的前列腺癌筛查最简便的方法是：前列腺直肠指检(DRE)、血清PSA检测、前列腺超声波检查。

前列腺直肠指检是前列腺癌诊断的经典技术，通过该检查可以判断前列腺结节的大小和形状，从而判断是否患有前列腺癌，但由于前列腺直肠指检发现的肿瘤一般较严重，对临床治疗帮助有限，所以欧美国家该技术不常使用。

其它诊断方法还有前列腺超声波检查等，但该方法容易与前列腺炎和前列腺肥大混同，所以已不再用于前列腺癌分期诊断

目前发明人所在的中国人民解放军第二军医大学附属长海医院使用的是血清PSA和穿刺相结合的方法。但是，PSA作为临床前列腺癌的诊断也存在诸多弊端，因为包括前列腺增生在内的多重泌尿系统疾病，都有可能导致PSA升高，而这也就有可能导致疾病的误检、误诊或者病情的延误。而穿刺活检的检出率与活体穿刺的次数、位置都有较大关系，不是非常稳定的诊断方案。

所以，如果能有一种检测试剂盒，可以提高前列腺癌的检出率和准确率，对于前列腺癌的临床治疗有着重大的意义。

微RNA(microRNAs；miRNA，又译小分子RNA)是真核生物中广泛存在的一种长约21到23个核苷酸的RNA分子，可调节其他基因的表达。miRNA来自一些从DNA转录而来，但无法进一步转译成蛋白质的RNA(属于非编码RNA)。miRNA通过与靶信使核糖核酸(mRNA)特异结合，从而抑制转录后基因表达,在调控基因表达、细胞周期、生物体发育时序等方面起重要作用。在动物中，一个微RNA通常可以调控数十个基因.

目前，在各种癌症的研究中，包括前列腺癌，miRNA仍旧是最为重要的研究热点之一。至今，已经有大量的证据证明，miRNA与癌症的发生和发展有着密切的联系。而且，有文献指出，在癌症病人人群血液中会出现与正常人群迥然不同的miRNA表达谱。换句话说，如果我们能够在病人身上发现这种被证实的miRNA表达谱，毫无疑问会大大提高我们做出临床诊断的把握。

而且，就技术而言，miRNA的检测本质上是一种血清RNA的QPCR检测，具有操作简便、检测灵敏、特异性好、重复性高等特点，现今已越来越多地被应用于临床检验技术中。

miRNA-410-(miRBase编号：MIMAT0001091)，其序列如下所示：AGGUUGUCUGUGAUGAGUUCG，该miRNA目前仅在小鼠和人体内被证实存在，且在新生小鼠中被证实存在表达差异。目前尚无对于人类的miRNA410-的功能研究的文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供前列腺癌诊断标志物，也在于提供miRNA410-的新用途，即在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用。

本发明提供了miRNA410-作为前列腺癌诊断标志物的应用。

本发明提供了miRNA410-在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用。

本发明人在前期动物实验中已证实，miR410-的高表达具有前列腺癌特异性。在普通实验动物，正常人及其非癌症细胞株中，几乎无法检测到miR410-的存在。但前列腺癌动物模型、细胞株、前列腺癌患者体内，可以检测到极高含量的miR410-。

本发明的主要技术方案如下：本发明是基于miRNA定量PCR检测的前列腺癌诊断试剂盒，可以通过定量PCR技术准确计算血清中miR410-的含量。

本发明所述的miRNA410-在制备前列腺癌诊断试剂盒中的应用，miRNA410-的序列如下所示：