[发明专利]miR-144及其抑制剂的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术microRNA的研究领域，更具体地讲，涉及miR-144及其抑制剂在制备治疗心脏疾病药物中的应用。

背景技术

MicroRNA是近年来在果蝇、线虫、小鼠和人等多种生命体中被发现的一类具有转录后调节活性的小分子RNA。这一内源性的小分子RNA的大量发现得益于两种技术，一种是microRNA cDNA文库的构建和测序技术；另一种是生物素标记的寡核苷酸探针捕获，通过接头引物进行PCR扩增的技术。通过文库的构建和测序，人们掌握了microRNA的大量序列信息，通过对这些序列进行生物信息学比对分析，人们发现大部分microRNA在物种间高度保守，在进化上高度同源。

关于microRNAs的基因组定位，早期普遍认为其位于基因间区域，但近几年研究发现大部分microRNAs位于基因的内含子中，随宿主基因的转录而转录，与宿主基因具有相似的表达谱；另一部分聚簇存在的microRNAs，能够单独转录，其表达水平受到多种因素的调节。这些microRNAs基因的转录产物须经过多步剪切加工才能形成成熟的microRNAs，进而发挥其生物学功能。首先，microRNAs基因经RNA聚合酶Ⅱ转录，形成Pri-microRNA，再经Drosha剪切，形成了具有发卡结构的Pre-microRNA；Exportin 5将其从胞核转运至胞浆后，经Dicer酶剪切，成双链microRNA分子；最后，双链分离，一条被降解，另一条成为成熟microRNAs，并与其它分子一起形成了RNA诱导的沉默复合体(RISC)。RISC通过与mRNA的3′端非编码区相互作用，引起mRNA的降解或者翻译过程的抑制，从而在转录后水平负性调节蛋白质表达。

生物信息学分析发现一个microRNA可能直接调控上百个基因的表达，进而调控了许多重要的细胞途径和生理病理过程。例如:MicroRNAs能够调控细胞的分裂、分化、增殖和凋亡；胚胎的发育,机体的能量代谢、激素分泌和造血功能以及应对压力胁迫等生理过程；肿瘤发生和心肌肥厚等病理过程。在心血管系统中，microRNAs参与了心脏和血管的疾病发生过程。MicroRNAs表达的紊乱，参与多种心血管疾病的发生过程。

MicroRNAs在心肌氧化应激及损伤中的功能研究有助于我们更好的理解其发病机理，进一步找到心肌损伤相关疾病相关(尤其是糖尿病心肌病,此外还包括缺血性心脏病、高血压性心脏病、特异性心肌病等)的药物靶点，从而为这类疾病的预防或治疗提供行之有效的途径。

microRNA-144(miR-144)为一种本领域已知的microRNA(miRNA)小分子，其对于调控RNA是有用的。然而，现有技术中对于miR-144生物学功能目前并不清楚。

本申请人之前已申请并获得中国发明专利CN201010193055.0，发明名称为“miR-199a及其抑制剂的应用”，公开号为CN102266569A，公开了miR-199a在制备治疗心肌缺血损伤药物中的应用，以及miR-199a抑制剂在制备治疗抑制心肌细胞肥大及慢性心衰药物中的应用。

氧化应激是由于体内活性氧自由基(ROS)产生过多和/或抗氧化能力降低，氧化和抗氧化系统平衡紊乱，从而导致导致潜在性损伤的病理过程。ROS的慢性或急性过度产生在心血管疾病的发生发展中起重要作用：活性氧通过多种信号通路介导心肌细胞肥大和凋亡；通过灭活一氧化氮等机制导致内皮功能紊乱。在动脉粥样硬化、心肌缺血再灌注损伤、高血压、心力衰竭等一些主要心血管疾病的病理生理学中，氧化应激均扮演关键角色，并不局限于本申请人现有专利技术中涉及的心肌缺血、肥大及慢性心衰。氧化应激过程可能是心肌凋亡的诱发因素,但二者是截然不同的两个病理生理过程。心肌凋亡是在一定的生理或病理条件下,心肌细胞启动细胞内特定程序,最后通过激活内源性DNA内切酶,导致细胞自然死亡，是一个积极的、精确调控的、消耗能量的过程，对心室重塑具有重要的作用。而氧化应激过程中产生的活性氧自由基不仅能介导细胞凋亡，对心肌细胞肥大、内皮功能紊乱、心肌炎症、心肌成纤维细胞增殖和激活均具有重要作用。氧化应激在动脉硬化、原发性高血压、心肌缺血/再灌注损伤、心房颤动、心肌病等多种心血管疾病的发生、发展中发挥着重要作用，因此抗氧化剂的应用在治疗心血管疾病方面显得尤为重要。理想的抗氧化剂，能够减少氧自由基的生产，减轻其对心血管的损伤，从而使更多的心血管疾病患者获益。因此，研究并制备抗心肌氧化应激损伤的药物具有非常重要的临床意义和价值。

目前国内外尚无有关miR-144与心肌氧化应激损伤相关的文献报道。