[发明专利]次氯酸根离子荧光探针、制备方法及其应用

权利要求书

1.一种次氯酸根离子荧光探针，其特征在于所述的探针为如式Ⅰ所示的联氨吡啶基荧光素衍生物：

2.一种如权利要求1所述次氯酸根离子荧光探针的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

第一步：将荧光素、氯仿、15-冠-5在甲醇溶液中反应，接着加入氢氧化钠溶液，反应后得到如式Ⅱ结构的荧光素单醛，

第二步：将荧光素单醛和肼基吡啶在乙醇溶液中反应生成的联氨吡啶基荧光素衍生物即为次氯酸根离子荧光探针。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于第一步的具体过程为：将荧光素溶于甲醇，加入摩尔比为2:1-10:1的氯仿,然后加入摩尔比为0.1％-10％15-冠-5，接着缓慢滴加10％-70％氢氧化钠溶液，反应结束后冷却，用浓度为10mol/L硫酸酸化，产生沉淀，过滤，收集沉淀，真空干燥，将产品用硅胶层析法分离，得到的浅黄色固体即为荧光素单醛。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于反应条件为：于40-60℃温度下反应，持续搅拌回流5小时或以上。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于第一步中在层析柱纯化过程中采用体积比200:3的二氯甲烷:甲醇为洗脱液。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于第二步的具体过程为：在30min内，向荧光素单醛的乙醇溶液中滴加溶有肼基吡啶的甲醇溶液进行反应，其中荧光素单醛和肼基吡啶的摩尔比为1：0.5-1:10。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的甲醇用量不超过乙醇用量的1/8。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述的反应条件为：于室温下反应，持续搅拌12小时或以上。

9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于第二步反应后进行纯化：产品为沉淀，在反应溶剂中析出，收集产品烘干得粗品，然后用正戊烷洗涤即得次氯酸根离子荧光探针。

10.一种如权利要求1所述次氯酸根离子荧光探针在次氯酸根离子含量检测、生物样本中次氯酸根的荧光显影中的应用。