[发明专利]一种透明质酸、硫酸软骨素、胶原蛋白肽、骨粉饲料和肥皂联产的方法有效
申请号: | 201510007701.2 | 申请日: | 2015-01-07 |
公开(公告)号: | CN104531817B | 公开(公告)日: | 2017-12-01 |
发明(设计)人: | 吴凌天;陈乔煜;黎宇航;吴珊珊;吴敬源;吴林元 | 申请(专利权)人: | 常熟理工学院 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K14/78;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/22;C07K1/18;C08B37/08;C11D9/02;C11D13/22;A23K10/26;A23K10/30;C02F9/04 |
代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204 | 代理人: | 肖明芳 |
地址: | 215500 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 透明 硫酸 软骨素 胶原 蛋白 骨粉 饲料 肥皂 联产 方法 | ||
1.一种透明质酸、硫酸软骨素、胶原蛋白肽、骨粉饲料和肥皂联产的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:
(1)软骨预处理:将动物软骨在蒸馏水中浸泡3~4h,再将动物软骨粉碎处理,放入反应釜中,加入蒸馏水,控制温度为75~80℃,加热1~2小时,然后分别收集上层骨油和下层软骨液;
(2)肥皂制备:
(2a)皂化:向步骤(1)得到的骨油中加入400g/L的NaOH水溶液,使NaOH和骨油的质量比为1:2.5~3,95℃条件下加热4~6h,加热过程中不断搅拌,得到混合体系A;
(2b)除杂:向步骤(2a)得到的混合体系A中加入硅藻土,其中,硅藻土与混合体系A的比例为10~20g:1L,在70℃条件下搅拌30~45分钟,然后过滤,收集滤液;
(2c)盐析:向步骤(2b)得到的滤液中加入香精;搅拌条件下,再向滤液中加入NaCl,使NaCl在滤液中达到饱和状态,盐析结束后滤出皂基,将滤液打入储罐A中;
(2d)成形:将步骤(2c)得到的皂基冷凝成皂板,然后切成皂坯,经干燥得到洗衣皂或香皂;
(3)酶解:用NaOH调节步骤(1)得到的软骨液的pH为7.5~9.0;向其中加入复合酶A,使复合酶A的总酶活与软骨质量的比例为1×106~1.4×106U:1kg,酶解1~4h;再用12mol/L的盐酸调节pH为6.5~7.5,向其中加入复合酶B,使复合酶B的总酶活与软骨质量的比例为4×105~6×105U:1kg,酶解2~5h;最后灭酶,得到混合体系B;
步骤(3)中,所述的复合酶A是木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶中的任意两种蛋白酶按照酶活比为1:1混合的混合酶;所述的复合酶B是中性蛋白酶、风味蛋白酶、胶原蛋白酶和菠萝蛋白酶中任意两种蛋白酶按照酶活比为1:1混合的混合酶;
(4)过滤:过滤步骤(3)得到的混合体系B,分别收集滤液和滤渣,将滤渣烘干、粉碎得到骨渣-变性蛋白复合物粉末;
(5)吸附:将步骤(4)得到的滤液加入糖胺聚糖专用吸附树脂柱内,经吸附处理后,得到吸附了糖胺聚糖的树脂柱,收集流出液;
步骤(5)中,所述的吸附处理,其吸附条件为:温度为50~70℃,pH4.0~6.0,以3~5BV/h的流速回流吸附4~6小时;所述的糖胺聚糖专用吸附树脂为BE-D82型糖胺聚糖专用吸附树脂;
(6)透明质酸和硫酸软骨素制备:
(6a)洗脱:
第一次洗脱:用15g/L的NaCl水溶液以3~5BV/h的流速对步骤(5)得到的吸附了糖胺聚糖的树脂柱进行第一次洗脱处理,得到洗脱液A,洗脱液A中含有胶原蛋白肽,将其与步骤(5)得到的流出液混合;
第二次洗脱:用35~40g/L的NaCl水溶液以3~5BV/h的流速再对吸附了糖胺聚糖的树脂柱进行第二次洗脱处理,得到洗脱液B,洗脱液B中含有透明质酸;
第三次洗脱:用120~140g/L的NaCl水溶液以3~5BV/h的流速对吸附了糖胺聚糖的树脂柱进行第三次洗脱处理,得到洗脱液C,洗脱液C中含有硫酸软骨素;
(6b)脱盐:将步骤(6a)得到的洗脱液B用5000Da的透析袋透析脱盐,得到截留液Ⅰ;将步骤(6a)得到的洗脱液C用1000~8000Da的超滤膜超滤脱盐,得到截留液Ⅱ;将透析液和超滤流出液打入储罐A中;
(6c)浓缩:将步骤(6b)得到的截留液Ⅰ和截留液Ⅱ分别通过三效浓缩器浓缩,浓缩到物料浓度在300~350g/L时,停止浓缩,得到浓缩液Ⅰ和浓缩液Ⅱ;
(6d)灭菌:对步骤(6c)得到的浓缩液Ⅰ和浓缩液Ⅱ分别进行灭菌处理,得到无菌浓缩液Ⅰ和无菌浓缩液Ⅱ;
(6e)干燥:将步骤(6d)得到的无菌浓缩液Ⅰ和无菌浓缩液Ⅱ分别加入喷雾干燥器内,进风温度185℃,出风温度90℃,进行干燥,分别得到透明质酸和硫酸软骨素成品;
(7)胶原蛋白肽制备:
(7a)脱色:将步骤(5)得到的流出液加入反应釜中,按照活性炭与流出液的比例为10~20g:1L加入活性炭,用12mol/L的盐酸调节pH为4.0~6.0,在40~70℃条件下处理1~3小时,然后过滤,收集滤液;
(7b)除腥脱臭:将步骤(7a)得到的滤液加入阴、阳离子交换树脂混合柱中,以5~8BV/h的流速,回流处理0.5~1h,收集流出液;
(7c)除杂:将(7b)得到的流出液用300-500Da的纳滤膜处理,得到截留液;将纳滤流出液打入储罐A中;
(7d)浓缩:将步骤(7c)得到的截留液通过三效浓缩器浓缩,浓缩到物料浓度为350~450g/L时,停止浓缩,得到浓缩液;
(7e)灭菌:对步骤(7d)得到的浓缩液进行灭菌处理,得到无菌浓缩液;
(7f)干燥:将步骤(7e)得到的无菌浓缩液加入喷雾干燥器内,进风温度185℃,出风温度85℃,干燥得到胶原蛋白肽成品;
(8)骨粉饲料制备:将步骤(4)得到的骨渣-变性蛋白复合物粉末按如下方法制备得到骨粉饲料:
骨粉-变性蛋白复合物60重量份、米糠10重量份、豆饼10重量份、麸皮10重量份、油菜籽渣10重量份;将以上复合物混合搅拌均匀,用饲料造粒机造粒即得所需骨粉饲料;
(9)废水处理:向储罐A中加入絮凝剂,搅拌10分钟,过滤,滤液用反渗透膜制备纯水,截留液经硅藻土过滤器过滤之后用蒸发结晶器结晶得到NaCl晶体,所述的絮凝剂为聚合氯化铝,使用量为5×10-3g/L。
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