[发明专利]一种米曲霉发酵液、由该发酵液制备的玉米秸秆糖液及制备方法和用途

权利要求书

1.一种米曲霉发酵液的制备方法，其特征在于，所述米曲霉发酵液含有锰过氧化物酶活性100～10000U/L，内切纤维素酶酶活性150～3000U/L，β-葡聚糖酶酶活性150～3000U/L，β-甘露聚糖酶酶活性50～2000U/L；所述米曲霉发酵液是以玉米秸秆为主要原料，米曲霉为菌株，经试管扩大培养、液体摇瓶培养、种子罐种子培养和液体发酵培养制得的：所述方法包括如下步骤：

a.试管扩大培养：将米曲霉菌种接种于马铃薯葡萄糖培养基中，在温度为25-45℃下培养3-8d，然后于1-10℃保藏，制得米曲霉试管斜面孢子；

b.液体摇瓶培养：将一环米曲霉试管斜面孢子接种于装有40-150mL液体摇瓶培养基的三角瓶中，三角瓶的转速为60-200转/分在温度为20-45℃的摇床上培养24-72h，制得液体摇瓶菌种；c.一级种子罐种子培养：按接种量为1-20％将液体摇瓶菌种接种于种子罐培养基中，在温度为20-45℃，搅拌转速为50-200转/分，每分钟通气量为0.2-2:1的条件下，培养18-72h，制得一级种子罐菌种；

每100mL液体摇瓶培养基和每100mL种子罐培养基所含有的各成分的重量为：

麸皮0.2-2g 麦芽糖0.1-3g 蛋白胨0.1-1g

硫酸亚铁0.0005-0.01g 硫酸镁0.005-0.2g

氯化钾0.01-0.2g

所述接种量为液体摇瓶菌种与液体摇瓶培养基的体积比；所述通气量为每分钟通入气体的体积与液体摇瓶培养基体积比；

d.液体发酵培养：按接种量2-20％将一级种子罐菌种接种到发酵培养基中，在温度20-45℃，搅拌转速50-200转/分，每分钟通气量为0.2-2:1条件下，培养3-10d，制得米曲霉发酵液；

每100mL发酵培养基所含有的各成分的重量为：

玉米秸秆粉1-8g 麦芽糖0.1-3g 木糖0-3g

蛋白胨0.3-3g 硫酸亚铁0.005-0.02g 硫酸镁0.05-0.2g

氯化钾0.01-1g 麸皮0.1-5 玉米粉0-1g；

所述麸皮的粒度为10-100目；

所述接种量为一级种子罐菌种与发酵培养基的体积比；

所述通气量为每分钟通入气体的体积与发酵培养基的体积比。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述一级种子罐菌种经二级种子罐种子培养后，再进行液体发酵培养，所述二级种子罐种子培养工艺为：按接种量为5-20％将一级种子罐菌种接种于种子罐培养基中，在温度为20-45℃，搅拌转速为50-200转/分，每分钟通气量为0.2-2:1的条件下，培养18-72h，制得二级种子罐菌种；

所述接种量为一级种子罐菌种与液体摇瓶培养基的体积比，所述通气量为每分钟通入气体的体积与种子罐培养基的体积比。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述二级种子罐菌种经三级种子罐种子培养后，再进行液体发酵培养，所述三级种子罐种子培养工艺为：按接种量为5-20％将二级种子罐菌种接种于种子罐培养基中，在温度为20-45℃，搅拌转速为50-200转/分，每分钟通气量为0.2-2:1的条件下，培养18-72h，制得三级种子罐菌种；

所述接种量为二级种子罐菌种与液体摇瓶培养基的体积比，所述通气量为每分钟通入气体的体积与种子罐培养基的体积比。

4.一种降解玉米秸秆制备玉米秸秆糖液的方法，其特征在于，所述方法包括以权利要求1所述的米曲霉发酵液为催化剂，以H₂O₂溶液为氧化剂进行降解。

5.如权利要求4所述的方法：其特征在于，所述方法包括如下步骤：

a)将玉米秸秆粉、米曲霉发酵液和水混合，预热；

b)添加0.5-5％H₂O₂溶液，搅拌，降解，获得混合液；

c)将混合液抽滤，收集滤液，获得玉米秸秆糖液。

6.如权利要求5所述的方法：其特征在于，所述方法包括如下步骤：

1)将玉米秸秆粉、米曲霉发酵液和水按1：0.2-5：5-50混合，20-60℃保温；所述玉米秸秆粉的粒度为20-100目；

2)搅拌转速30-300转/分条件下，进行搅拌；

3)在3-10h内，匀速加入玉米秸秆粉重量5-20倍的0.5-5％H₂O₂溶液，在温度为20-60℃，搅拌转速30-300转/分条件下，降解5-20小时，获得混合液；

4)将混合液抽滤，收集滤液，获得玉米秸秆糖液。