[发明专利]一种基于荧光猝灭法检测小麦粉中过氧化苯甲酰的方法

说明书

技术领域

本发明涉及面粉改性剂检测领域，特别是涉及一种基于荧光猝灭法检测小麦粉中过氧化苯甲酰的方法。

背景技术

纯天然的面粉由于含有蛋白质裂解酶和类胡萝卜素等色素颜色较为暗淡，不适于生产得到高质量的面粉产品。过氧化苯甲酰(BPO)作为一种允许使用的面粉改良剂，可以与色素迅速、完全反应，从而将面粉脱色。此外还具有增筋、杀菌等效果，但过量的BPO会直接使面粉中维生素B1的分解加大，从而降低其营养价值，长期摄入会对人体造成一定的危害。我国GB2760-1996明确规定，面粉中添加过氧化苯甲酰含量必需低于60mg/kg。

目前过氧化苯甲酰的检测方法有气相色谱法、液相色谱法、离子色谱法、分光光度法和化学发光法。色谱法虽然准确性强、灵敏度高，但是所需仪器昂贵，实验步骤比较繁琐，实验时间也比较长，需要12小时以上，此外，还需要12小时以上，此外，还需要操作人员受过较高的专业训练，因此不易普及。

发明内容

为解决以上技术问题，本发明提供一种高精度的检测小麦粉中过氧化苯甲酰的方法，由于BPO容易分解，释放出氧对一般物质产生的荧光造成猝灭，所以一般不能采用荧光光谱法进行测定，但可以间接测定，BPO具有氧化性，利用这一性质，将Fe(Ⅱ)氧化为Fe(Ⅲ)，同时以左氧氟沙星为荧光剂，Fe(Ⅲ)能够猝灭盐左氧氟沙星的荧光，通过左氧氟沙星与Fe(Ⅲ)的荧光效应来间接测定BPO的含量。

为达上述目的，本发明一种基于荧光猝灭法检测小麦粉中过氧化苯甲酰的方法，包括以下步骤：

标准曲线的绘制：配置n个成梯度浓度的过氧化苯甲酰乙醇溶液和n+1个等浓度等量的硫酸亚铁铵水溶液，取等量的n个过氧化苯甲酰乙醇溶液和1个空白乙醇加入等量的n+1个等浓度等量的硫酸亚铁铵水溶液中，之后继续分别加入等浓度等量的盐酸左氧氟沙星水溶液混合均匀后，静置并分别检测荧光强度，绘制标准曲线，进一步得线性回归方程：

ln(F₀/F)＝0.2669C

式中F₀为空白乙醇溶液中盐酸左氧氟沙星的荧光强度，F为不同浓度的过氧化苯甲酰乙醇溶液中，盐酸左氧氟沙星的荧光强度；

样品检测：取待测样品面粉乙醇溶液，加入硫酸亚铁铵，静置后加入0.4g/L盐酸左氧氟沙星水溶液，静置后检测样品溶液的荧光强度，由线性回归方程计算出待测面粉中过氧化苯甲酰的浓度。

其中所述标准曲线绘制步骤中加入盐酸左氧氟沙星水溶液后的静置时间为15min。

其中所述样品检测步骤中加入硫酸亚铁铵后的静置时间为30min，加入盐酸左氧氟沙星水溶液后的静置时间为15min。

本发明与现有技术不同之处在于本发明取得了如下技术效果：

本发明通过氧化苯甲酰溶于乙醇时可将Fe(Ⅱ)氧化成Fe(Ⅲ)，而盐酸左氧氟沙星有较强而稳定的荧光，在与Fe(Ⅲ)络合后，从而使其荧光发生猝灭，因而可通过该方法间接测定BPO含量。此方法用于检测面粉中的过氧化苯甲酰与已经报道的色谱法和光度法相比，具有稳定性好、仪器简单、成本低、操作简单、检测迅速、准确性高、检出限的优点，可用于面粉中过氧苯甲酰含量的测定。

下面结合附图对本发明作进一步说明。

附图说明

图1在硫酸亚铁铵和盐酸左氧氟沙星体系中加入不同浓度的BPO的荧光光谱图，其中硫酸亚铁铵的浓度为0.24g/L，盐酸左氧氟沙星的浓度为0.16g/L，从1号到5号BPO的浓度分别为0、0.0002、0.0004、0.0008、0.0016g/L。

图2加入BPO后的标准曲线。

具体实施方式

以下结合实施例，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。

本发明一种小麦粉中过氧化苯甲酰的荧光光谱检测法，依照下列步骤进行：

1、配制过氧化苯甲酰储备液

准确称取过氧化苯甲酰于容量瓶中，加入无水乙醇溶解，用无水乙醇定容至刻度线处，摇匀，配制成浓度为0.1g/L的过氧化苯甲酰储备液，置于4℃冰箱中，备用。

2、配制待测样品溶液

准确称取待测面粉，置于盛有无水乙醇的锥形瓶中，面粉与无水乙醇的质量比为1:10，密封锥形瓶，在恒温磁力搅拌器上搅拌1小时，使待测面粉中的过氧化苯甲酰充分溶解，将混合液转移至离心管中，1500转/分钟，吸出上清液置于容量瓶中，用无水乙醇定容至刻度线处，配制成待测样品溶液，放入4℃冰箱中，待检。

3、制备Fe(Ⅱ)溶液