[发明专利]一种抗肿瘤T细胞、其制备方法和抗肿瘤药物在审
申请号: | 201510013987.5 | 申请日: | 2015-01-12 |
公开(公告)号: | CN104630145A | 公开(公告)日: | 2015-05-20 |
发明(设计)人: | 杨世成 | 申请(专利权)人: | 杨世成 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;A61K35/13;A61K39/00;A61P35/00 |
代理公司: | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人: | 竺路玲 |
地址: | 518057 广东省深圳市南山区高新技术*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 肿瘤 细胞 制备 方法 药物 | ||
1.一种抗肿瘤T细胞,其特征在于,所述抗肿瘤T细胞是以肿瘤总RNA负载的树突状细胞DC特异性扩增和富集抗肿瘤T细胞。
2.根据权利要求1所述的抗肿瘤T细胞,其特征在于,所述抗肿瘤T细胞中还包括细胞因子。
3.根据权利要求2所述的抗肿瘤T细胞,其特征在于,所述细胞因子选自IL-4、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21、GM-CSF、CD40L中的任意一种或多种组合。
4.根据权利要求2所述的抗肿瘤T细胞,其特征在于,所述细胞因子选自IL-7、IL-12、IL-21的组合。
5.如权利要求1所述抗肿瘤T细胞的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1、肿瘤总RNA的制备:来自经细胞培养的肿瘤细胞经体外合成为肿瘤总RNA;
步骤2、成熟肿瘤总RNA-DC的制备:将步骤1得到的肿瘤总RNA与分离的树突细胞DC通过电转导的方式导入DC内,随后在培养基中培养过夜,得到成熟的肿瘤总RNA-DC;
步骤3、将步骤2得到的成熟肿瘤总RNA-DC与T细胞共培养,得到如权利要求1所述的抗肿瘤T细胞。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1的肿瘤细胞来自人类或鼠的肿瘤细胞。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2的树突细胞来自人类或鼠的髓细胞或淋巴细胞。
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2在培养基中加入CD40L或脂多糖LPS来实现DC的成熟。
9.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3的共培养在细胞因子的存在下进行。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述细胞因子选自IL-4、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21、GM-CSF、CD40L中的任意一种或多种组合。
11.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述细胞因子选自IL-7、IL-12、IL-21的组合。
12.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3的T细胞来自人类或鼠的脾脏。
13.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3的T细胞为抗原应答细胞,包括CD4+T细胞、CD8+T细胞、效应T细胞、记忆T细胞。
14.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3的成熟肿瘤总RNA-DC与T细胞的数量比为1:(15-25)。
15.一种抗肿瘤药物,其特征在于,所述抗肿瘤药物以权利要求1所述的抗肿瘤T细胞为活性成分。
16.根据权利要求15所述的抗肿瘤药物,其特征在于,所述抗肿瘤药物为药剂或接种疫苗。
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