[发明专利]PCT/SAA联合快速检测用试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

    本发明属于生物医药领域，涉及一种人降钙素原（procalcitonin，PCT）和血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）联合快速检测用试纸条及其制备方法，具体地说是一种应用双抗夹心法原理的胶体金免疫层析法，配合免疫层析读数仪，同时实现对PCT/SAA二项目进行现场快速检测的方法。

背景技术

本品采用双抗夹心法和胶体金免疫层析技术，同时快速检测人全血、血清或血浆样本中的降钙素原（PCT）和血清淀粉样蛋白A（SAA），可用于炎症等感染类疾病的辅助诊断。

近年来，随着胶体金免疫层析技术及生化制备技术的发展，用胶体金免疫层析法快速检测人全血、血清或血浆中的一种或同时几种因子、抗原、蛋白已成为现实，本发明所述的PCT/SAA的检测就属于联合检测的一种。

人降钙素原（procalcitonin，PCT）是无激素活性的降钙素（calcitonin，CT）前肽物质，由116个氨基酸组成、分子质量为13kD的糖蛋白。PCT半衰期为25-30h，体内外稳定性很好。正常情况下，PCT在受到荷尔蒙刺激后仅由甲状腺的C细胞分泌，其浓度通常小于0.1ng/ml。而在促炎症刺激下，特别是在受到细菌感染时，PCT由大量全身各类细胞产生。在全身性细菌、真菌、寄生虫感染和脓毒症等异常情况下，PCT异常升高，而降钙素（CT）则无明显变化。血PCT水平与感染及损伤的严重程度呈正相关。在感染刺激下的3-6小时内即可观察到PCT不断上升达高峰，并持续24小时。当PCT浓度大于0.5ng/ml时极可能感染细菌，需要使用抗生素治疗。目前PCT成为早期诊断全身性重症细菌感染的敏感性指标。

血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）是一种急性时相反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12kD。正常人血清SAA浓度平均值为2.33mg/L。在急性时相反应中，经IL-1、IL-6和TNF刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，可升高到最初浓度的100-1000 倍，但半衰期短，只有50分钟左右。

SAA的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断非特异炎症、评估其炎症活性程度、监控其炎症活动及对其治疗的效果。且SAA一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白 A (AA) 原纤维的方式沉积在不同的器官中，引起脏器纤维化，在慢性炎症性疾病发生发展过程中影响脏器的功能，而产生一种严重的淀粉样变性并发症。所以在淀粉样变性患者中，将SAA 水平回复至正常为宗旨的治疗，能改善病情发展。另外，与PCT不同的是，在病毒感染的初期SAA水平也明显增高。因此，SAA检测在诊断肾移植排斥反应伴发病毒感染的患者（特别是进行免疫抑制治疗的患者）以及用肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比 PCT更能够准确判断炎症的活动状态。

因此，联合快速检测PCT和SAA比二者任一单独使用时应用范围更广，更便捷，在诊断感染时，诊断结果更准确，临床参考价值更高。

胶体金免疫层析法具有快速、简便的特点且操作无须专门仪器和场所，对操作人员没有很高要求，结果分析清楚，易于判断，因此非常适合于在缺少设备的边远山区、基层医院、诊所和床边开展并能满足家庭或个人在诊断、保健、体检等方面的运用。

发明内容

本发明的目的在于为解决背景技术中提到的，方便联合检测人全血、血清或血浆中降钙素原（procalcitonin，PCT）和血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A protein，SAA）含量的方法需求，提供一种PCT/SAA联合快速检测用试纸条，可以解决现有技术存在的不能在一条试纸中同时检测PCT/SAA的问题。本发明提供了一种适合进行现场检测，简单方便、稳定可靠、成本低廉、灵敏度高的快速联合定量检测PCT/SAA的胶体金免疫层析试纸及其检测方法。

本发明的另一个目的是提供该试纸条的制备方法。